• 各种感受态细胞的区别、用途和特征

    Xl1-Blue菌株 基因型: endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 F'[Tn10 proAB+ lacIq Δ(lacZ)M15] hsdR17(rK- mK+)。 特点: 具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性
    2010-02-26
  • DNA片段的回收与纯化

    一、实验目的 学习与掌握从琼脂糖电泳中回收DNA片段的方法 二、实验原理 对于混合的DNA样品(例如限制性酶切产物等)进行检测和纯化的一种常用方法是进行琼脂糖电泳分析,从电泳后的凝胶中回收出某一DNA带,经过有机溶剂的抽提等一系列纯化过程,便可得到纯化的DNA片段,回收的方
    2010-02-28
  • 重组质粒的抽提

    一、 实验目的 了解基因工程操作中运载基因的载体,掌握最常用的提取质粒DNA的方法。 二、实验原理 碱变性抽提质粒DNA是根据质粒DNA与染色体DNA的变性与复性差异而达到分离的目的。利用溶菌酶、强碱(NaOH)及表面活性剂(SDS)使细胞破壁、膜,释放出胞内染色体DNA、
    2010-02-28
  • 酵母DNA的提取

    酵母DNA的提取 1. 新鲜的菌体中加入150ul(200ul)bufferiI25(30)ul蜗牛酶(30mg/ml),37度,10Min(可以30min水浴,中间隔5分钟,振荡一次,避免细胞沉到管底。 2. 离心10000rmp,10min,去上清,沉淀中加入buffer
    2010-03-02
  • 植物总基因组DNA提取纯化方法综述

    摘要 归纳植物DNA 提取各个环节,同时对DNA 提取过程中的常见问题、原因及应对策略作简要的分析。 关键词 植物;总基因组DNA;提取;纯化;进展 Advances of Genome DNA Extraction and Purification in Plants A
    2010-03-04
  • 植物基因组DNA提取

    原理: 用植物基因组DNA提取液处理研磨、收集后的样品,提取液中的乙二胺四乙酸二钠(EDTA)能螯合金属离子,以防止破碎细胞的脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用,而细胞破碎液中的蛋白酶K在37℃温浴过程中还能降解蛋白质,从而减少了蛋白质对DNA的污染。然后用CTAB处理,在特定的
    2010-03-06
  • 碱法小量制备重组质粒

    实验原理: 从大肠杆菌细胞中分离质粒DNA的方法很多。其分离可依据分子大小不同、碱基组成的差异以及质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的特点来进行。目前常用的有碱变性提取法,羧基磷灰石柱层析法、质粒DNA释放法、两相法等。其中碱变性法提取效果良好,既经济且收得率较高,提取到的质粒
    2010-03-06
  • 植物DNA的提取(CTAB法)

    实验内容 采用CTAB法从植物叶片中提取基因组DNA,并进行纯度分析和琼脂糖凝胶电泳。 目的要求 掌握CTAB法从植物叶片提取DNA的原理和方法。 实验原理 1、原理 核酸是生物有机体中的重要成分,在生物体中核酸常与蛋白质结合在一起,以核蛋白的形式存在。核酸分为脱氧核
    2010-03-07
  • 质粒DNA的制备及一种快速可靠的小量制备质粒DNA的方法

    从大肠杆菌细胞中分离质粒 DNA 的方法众多,其分离的依据可根据分子大小不同、碱基组成的差异以及质粒 DNA 的超螺旋共价闭合环状结构的特点进行。目前常用的有碱裂解法 ( 又称碱变性抽提法 ) 、羟基磷灰石柱层析法、质粒 DNA 释放法、酸酚法、两相法以及溴化乙锭 - 氯化铯密度
    2010-03-07
  • 园艺植物基因组DNA的提取及浓度测定

    1 目的 掌握用改良CTAB法提取园艺植物总DNA的原理和方法,并分别用核酸蛋白测定仪和凝胶电泳法检测出所提DNA的质量。 2 原理 2.1 DNA提取:CTAB是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸和酸性多聚糖的特性,在高离子强度的溶液里,CTAB则与蛋白质和
    2010-03-07