• IN VITRO FOOTPRINTING METHODS

    IN VITRO FOOTPRINTING METHODS Preparation of labeled probes: There are several choices available in the labeling of DNA termini for subseq
    2010-03-07
  • 植物叶绿体基因组基因表达调控的研究

    摘要:叶绿体基因的表达在许多方面与原核基因表达相似,所以最早的理论认为叶绿体基因的表达与原核相似,是在转录起始水平上的调控,进一步的研究认为叶绿体基因表达调控是在不同水平上进行的如:转录水平的调节、转录后调节与修饰、翻译和翻译后修饰等。 关键词:叶绿体;叶绿体基因组;表达调控
    2010-03-07
  • Genotyping using Affymetrix arrays

    Sample DNAs should not be highly degraded nor contain PCR inhibitors, such as high concentrations of heme or chelating agents. For each indi
    2010-03-07
  • 人类基因组标准寡核苷酸库基因序列的选择和探针的设计

    一、介绍 人类基因组标准寡核苷酸库针对人类基因组中20,726个确证的基因设计了22,740个70mer的寡核苷酸探针。每一个探针都经过了严格设计和优化,从而确保了基因表达阵列分析能得到非常好的结果。 人类基因组标准寡核苷酸库以60个384孔板的形式提供。每一孔含有600pm
    2010-03-07
  • 核酸抽提注意事项——从心态、知识、仪器、试剂和操作说起

    最糟糕的心态-实验失败了,抱怨试剂不好。实验人员本来是应该拥有修正主义、机会主义、怀疑论等诸多“不完美的”意识,所以一定要用“完美的”自我批评意识来平衡。我为什么没有一双慧眼选择可靠的供应商?我为什么不做预实验检测所购试剂? 最糟
    2010-01-11
  • SDS裂解法大量提取质粒的方法步骤

    本法[根据Godson和Vapnek(1973)的方法修订而成]的产量要低得多,相对其他方法更温和,是提取大质粒(大于15kb)的首选方法。 试验步骤: 1、将500ml细菌沉淀物洗过后重悬于10ml用冰预冷的10%蔗糖、50mmol/L Tris.Cl(pH8.0)溶液中,
    2010-03-21
  • 核酸分离提取的原则和注意事项

    核酸包括DNA、RNA两种分子,在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子,原核生物的“染色体”、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子;有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子,RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子,不同类型的RNA分子可以具有不同
    2010-01-19
  • 高质量基因组DNA的提取和基因组步行法扩增3’及5’侧翼序列

    原理 基因组步行技术是一种新发展的利用已知序列(cDNA或基因组DNA)从基因组中获得基因的上游(如启动子)或下游序列的方法。其原理如下:首先利用不同的具有平末端的 DNA 限制性内切酶消化基因组 DNA,然后将预先设计好的 DNA 接头连接在 DNA 的两端,这样的一组两端带
    2010-01-20
  • 大肠杆菌质粒DNA的提取和质粒DNA琼脂糖凝胶电泳鉴定

    一、大肠杆菌质粒DNA的提取 质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术,但提取方法有很多种,以下介绍一种最常用的方法: 碱裂解法:此方法适用于小量质粒DNA的提取,提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下: 1、接1%含质粒的大肠杆菌
    2010-01-21
  • 关于质粒提取的常见问题与解析

    涂布棒在酒精蘸一下,然后烧一下,能不能保证把所用的菌烧死? 参考见解:涂布棒可以在酒精中保藏,但是酒精不能即时杀菌。蘸了酒精后再烧一小会,烧的是酒精而不是涂布棒。建议涂布棒还是干烧较长时间后,冷却了再涂。同时作多个转化时,应用几个涂布棒免得交叉污染。 原先测序鉴定没有问题的细
    2010-01-21