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1. 细菌离心后，加入溶液I蜗旋振荡时，发现菌体呈絮状不易混匀，或成细砂样。—— 很可能是细菌发生溶菌，可减少培养时间、降低培养温度试试看，通常降低培养温度 会使细菌生长更加稳定；同时也可以试试平板培养 ，培养后，用PBS将菌落洗下，再进行质粒的提取，固体培养基上细菌生长的要好一

一、质粒提取导论 已经提出过许多方法用于从细菌中提纯质粒DNA，这些方法都含有以下3个步骤: 细菌培养物的生长。 细菌的收获和裂解 质粒DNA的纯化。 (一)细菌培养物的生长 从琼脂平板上挑取一个单菌落，接种到培养物中(有含有行当抗生素的液体培养基中生长)，然后从中纯

近日撰写了一个关于核酸抽提的基础现状的草稿；没有去找参考书润色，所以会有点凌乱。首先声明的是：这篇东西只为有一定核酸抽提基础知识的人准备，同时也将会及时修改。那些分子生物学的过客，最好不要看本文；一是我的思维有点跳跃，二则是没有必要糟蹋自己的时间。 写这篇东西的另外一个原因是，

该法[根据Holmes和Quigley（1981）的方法修订而成] 可与随后的纯化步骤如氯化钯-溴化乙锭梯度平衡离心等步骤联合使用。建议该法只用于经氯霉素处理的培养物，未处理的培养裂解后过于粘稠，不利于操作。当从大肠杆菌HB101或其衍生质粒（包括TG1）中大量提取质粒时，不宜采

一、实验原理 细菌质粒是一类双链、闭环的DNA，大小范围从1kb至200kb以上不等。各种质粒都是存在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份，通常情况下可持续稳定地处于染色体外的游离状态，但在一定条件下也会可逆地整合到寄主染色体上，随着染色体的复制而复制，并通过细

一.实验目的： 1、 掌握质粒 DNA 分离，纯化的原理 2、 学习煮沸法快速提取质粒 DNA 的方法 3、 学习 DNA的限制性酶切的基本技术 4 、 学习利用琼脂糖电泳测定 DNA片段的长度 二.实验原理： 在基因工程中， DNA 分子的切割是由限制性内切酶来完成

0 实验简介 质粒DNA是存在于细菌染色体外的一个或多个能独立复制并稳定遗传的小型环状双链DNA分子。基因克隆实验中常将质粒作为携带目的基因的载体。目前从细菌中提取质粒DNA多采用碱裂解法,该法操作简便，实验时间短的优点。现将具体实验操作介绍如下： 实验中使用的主要仪器：台式

原 理 1．质粒DNA的提取 把一个目的DNA片段通过重组DNA技术，进入受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(Vector)。质粒(Plasmid)作为携带外源基因进入细菌中扩增或表达的主要载体，广泛应用于基因操作的各个方面。因此，质粒的分离与提取是分子生物学中最常用、最

一、大肠杆菌质粒DNA的提取 质粒DNA的提取是从事基因工程工作中的一项基本实验技术，但提取方法有很多种，以下介绍一种最常用的方法。 碱裂解法：此方法适用于小量质粒DNA的提取，提取的质粒DNA可直接用于酶切、PCR扩增、银染序列分析。方法如下： 1、接1%含质粒的大肠杆菌

吴立柱 郑海洲 朱昀 霍晨敏 沈银柱 黄占景 河北师范大学生命科学学院河北石家庄 摘要 碱裂解法是进行分子克隆实验中质粒DNA制备最为常用的方法! 在实际实验操作过程中"对该实验方法进行了改进"改进的碱裂解法解除了所提质粒DNA中RNA污染及RNase 的可能影响"快速提取法