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一、实验原理 真核生物的一切有核细胞（包括培养细胞）都能用来制备基因组 DNA。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内，因此，制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离，又要保持DNA分子的完整。提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS（十二烷基

一、原理与意义 先用细胞裂解液对已制备好的组织匀浆充分裂解，然后用蛋白酶去除其中的蛋白，再用氯仿一次抽提（无需用酚抽提）、预备液沉淀、RNase去除 RNA、乙醇再沉淀即可得到完整DNA。该方法适用于从人或动物的各种组织、血液、培养细胞、G+/G-细菌中快速抽提基因组DNA。抽

这种方法最早用Richaed Treisman参照Lis的工作而设计。Lis是最早用聚乙二醇（PEG）分离不同大小DNA的人。Treisman法被广泛用于碱裂解法制备的质粒DNA的纯化。首先将粗提质粒DNA用氯化锂处理沉淀大分子RNA，用RNA酶消化污染的小分子RNA。然后用含P

细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子，均与蛋白质结合成核蛋白（nucleoprotein）。DNA与蛋白质结合成脱氧核糖核蛋白（deoxyribonucleoprotein，DNP），RNA与蛋白质结合成核糖核蛋白（ribonucleoprotein，RNP）。其中真核生物的D

一、分离与纯化的方法 双链DNA因固有的结构特点，是一种惰性很强的化学分子，可用于重现犯罪现场和进行古生物学分析。但由于是很长的线性分子（如人的染色体DNA平均长度为100～150Mb）而且缺乏横向的稳定性，因此很容易断裂。在溶液中，由于碱基堆砌力的相互作用与磷酸基团的静电排斥

大多数质粒都是双链的共价闭合环状质粒（CCC plasmid）DNA，简称闭环质粒（closed circular plasmid，CC plasmid）。作为携带外源基因在细菌中扩增或表达的重要载体（vector），质粒在基因工程中应用十分广泛。有关质粒的提取与纯化是必须掌握的

【实验目的】 了解从动物组织中提取DNA的原理，掌握DNA定磷法、紫外法、二苯胺法检测及琼脂糖平板电泳操作方法。 【实验原理】 生物体组织细胞中的脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），大部分与蛋白质结合，以核蛋白——脱氧核糖核蛋白（DNP）和核糖核蛋白（RNP）的形式

准备工作： 细菌培养：小量提取质粒DNA 鉴定正确后，将菌液以1/50~1/20体积的比例接种到250ml液体培养基中，37℃振荡培养过夜至对数生长晚期。 注：培养体积与最终质粒DNA 的收获量并无线性关系。只要培养条件适宜，50ml的培养液有时也可得到总量高达1mg以上的质

一、实验目的： 1、学习克隆工作中最常用的双酶切； 2、学习将外源基因与质粒连接方法及操作技术； 3、学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的技术； 4、了解细胞转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。 5、外源质粒DNA转入受体菌细胞的技术以及筛选转化体的技术。 6、学

实验目的 (1) 了解质粒的特性及其在分子生物学研究中的作用 (2) 掌握质粒DNA分离、纯化的原理 (3) 学习碱裂解法和煮沸法分离质粒DNA的方法 实验原理 质粒（Plasmid）是一种双链的共价闭环状的DNA分子它是染色体外能够稳定遗传的因子。质粒具有复制和控制机