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1、将适量的菌体悬浮于500μl溶菌酶溶液（2%）中，37℃温育1hr 左右至完全溶菌， 2、加入500μl碱性SDS溶液（0.3mol/L NaOH, 2%SDS），立即振荡混合完全， 3、打开管盖，在70℃放置15min（对大于20kb的质粒则最好放在55℃， 30min

药品试剂： 经BamHI 及HindIII 作用的pBlueGus 及pQE31 含EtBr 的1.2% 12-well agarose gel 1×TAE 电泳缓冲液 QIAquick Gel Extraction Kit （Qiagen），内含： QIAquick

利用离子交换的原理，在低盐情况下使DNA 吸附在带正电荷的滤膜上，再利用含有高浓度盐类的缓冲液将DNA 自膜上溶离下来。 仪器用具：Mupid II 迷你电泳槽；UV transilluminator;防护面罩；扁平药匙；干净刀片；65℃水浴或恒温槽 易生物仪器库：http:

由于真菌菌丝体中多糖含量较高，很多方法不易去除干净，不能用于做基因组酶切。 使用如下方法提取菌丝DNA产量高，多糖和蛋白质含量低，符合分子生物学研究要求。 1、取1 g 菌丝体放入冰箱中冻结，然后置于研磨钵中研磨成浆，转入1.5 ml的离心管中； 2、加入0.7 ml提取缓

1. 从平板上挑单菌落，越多越好（20-30），放于1.5ml离心管中，加1.2ml 左右的液体LB培养基，摇3-5h. 200rpm。 2. 用1.5ml离心管收集一定量（1ml，留0.2ml）含有重组质粒的菌液，10000rpm， 30sec，弃上 清，留管底沉淀（应留有一

细胞DNA的提取： （1）消化细胞后以1500r/min离心，去上清后重悬于冰冷的1×TBS中，再次离心加入0.5ml提取缓冲溶液（RNA酶临时加入），移入 EP管中。 （2）37℃孵育1h，加4μl蛋白酶K/ml，50℃孵育3h。 （3）加入0.5ml酚/氯仿（1：1 V

利用亚精胺对含多糖、多酚类物质较多的植物、真菌等材料的DNA进行纯化，以去除杂质，利于后续试验。 1、加入400mlTris-HCl（100mM 8.0），溶解DNA 2、400ml亚精胺（5mM）振荡 3、4 ℃，放置15分钟 4、4 ℃，17000g，离心15分钟，弃

1、取0.1~0.2 g左右小麦叶片于1.5 ml的Eppendorf离心管中，将离心管直接放入盛液氮的冰壶中冷冻。从冰壶中取出离心管，用小玻璃研棒直接插入离心管中迅速研磨，至淡黄色粉末为宜； 2、向离心管中加入600 ml的DNA提取缓冲液S，振荡充分混匀，65 ℃水浴30

基本概念： 总DNA（total DNA, genomic DNA）凝胶电泳 [实验目的] 1.学习细菌总DNA提取的原理和方法 2. 学习琼脂糖凝胶电泳方法 [实验材料] 1.菌种 自己分离纯化后的细菌菌株 2.试剂 TE、溶菌酶溶液（20mg/ml）、10%

胶回收 1. 提高胶回收量的办法： 1) 增加电泳时的上样量。 2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。 3) 切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。 4) 把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。