• 基因工程常用的工具酶

    一、限制性核酸内切酶(restriction endonuclease) 1.定义:凡能识别和切割双链DNA分子内特定核苷酸序列的酶,也称为限制酶(restriction enzyme,RE)。 2.类型:来自原核生物,有三种类型。 Ⅰ型:兼具甲基化修饰和ATP参与的核酸内
    2010-05-24
  • 外源基因在原核细胞中的表达系统

    外源基因在原核细胞中表达是基因工程操作中最初取得成功的途径。 1 原核生物基因表达的特点 同所有的生命过程一样,外源基因在原核细胞中的表达包括两个主要过程:即 DNA转录成mRNA和 mRNA翻译成蛋白质。与真核细胞相比,原核细胞的表达有以下特点: ①原核生物只有一种RNA
    2010-07-22
  • 外源基因在真核细胞中的表达系统

    1. 真核生物表达的优越性和必要性 ① 真核生物具有转录后加工系统,可识别并删除基因中的内含子,剪切加工为成熟mRNA. ②具备完善的翻译后加工系统,可进行糖基化、乙酰化等修饰,使蛋白形成正确的天然构型,因而真核生物表达系统产生的蛋白更接近天然状态,有利于其功能、生物活性的研
    2010-07-22
  • DNA甲基化——表现遗传学中DNA的修饰

    DNA甲基化是哺乳动物DNA最常见的复制后调节方式之一,是正常发育、分化所必需的,具有重要的生物学意义。 在DNA甲基转移酶 (DNAmethyltransferase,DNMT)的作用下,以S—腺苷甲硫氨酸(SAM)为甲基供体,可以将甲基基团转移到基因组DNA胞嘧啶第 5位碳
    2010-07-19
  • 组蛋白修饰与DNA甲基化之间的关系

    在引起基因沉默的过程中,沉默信号(DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重新装配)是如何进行的?谁先谁后?这是一个“鸡和蛋”的问题,目前仍处于研究阶段,还没有定论。研究发现DNA甲基化和组蛋白乙酰化是一个相互促进、加强的过程,如许多HDAC可以和DNMTl、3a、3b相互作用;而甲基化
    2010-05-20
  • DNA甲基化在肿瘤发生中的作用

    越来越多的研究表明,在肿瘤形成过程中包含两大类机制。一个是通过DNA核苷酸序列改变而形成突变,即遗传学机制。肿瘤作为一种遗传学疾病在分子生物学领域已经得到证实。另外一个就是表观遗传学(epigenetics)机制,即不依赖DNA序列改变导致基因表达水平的变化,它在肿瘤形成过程中的
    2010-05-20
  • 甲基化检测方法(亚硫酸氢盐修饰后测序法)

    第一部分 基因组DNA的提取。 这一步没有悬念,完全可以购买供细胞或组织使用的DNA提取试剂盒,如果实验室条件成熟,自己配试剂提取完全可以。DNA比较稳定,只要在操作中不要使用暴力,提出的基因组DNA应该是完整的。 此步重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重
    2010-05-20
  • 甲基化芯片在表观遗传学的应用研究

    表观遗传改变可以定义为基因的遗传性或获得性改变,但是这种改变和DNA序列改变无关。DNA甲基化是最为常见的表观遗传改变;启动子或第一外显子CpG岛中的甲基化改变将导致基因表达失活;组蛋白的化学修饰也可以作为表观遗传改变;组蛋白发生乙酰化改变的基因通常被开启。 CpG岛的异常甲基
    2010-05-20
  • DNA甲基化分析方法(Methods of DNA methylation analysis)

    1.DNA甲基化是表观遗传学的重要研究内容 D N A 甲基化是表观遗传学的重要研究内容之一,它可以在转录水平抑制基因的表达。甲基化通常发生在胞嘧啶的C5 位,形成5- 甲基胞嘧啶(5mC),甲基化的胞嘧啶多位于CpG 岛上。CpG 岛是CpG 二联核苷富集区域,CG含量大于5
    2010-05-20
  • 表观遗传学分子生物学软件——DNA甲基化分析工具

    第一类:基于引物设计功能的软件。此类软件主要是针对重亚硫酸盐序列进行甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR, MS-PCR or MSP)和重亚硫酸盐测序(bisulfite sequencing, BS)引物的设计。由于重亚酸盐修饰的特殊性,使常规
    2010-08-12