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1 材料 一周龄Wistar 大鼠，D-Hanks’液，胰蛋白酶，Ⅴ型胶原酶，葡萄糖，碘乙酸。2 方法 一周龄Wistar大鼠，断颈处死，于75%乙醇浸泡15 分钟，无菌取出胰腺，于冰冷无菌D-Hanks’液中漂洗，用眼科剪仔细清除脂肪、包膜、血管等胰外组织，转入青霉素小瓶中

Material :　　1. 培养皿、培养瓶、烧瓶、试管等。　　2. 分离组织需要的眼科剪子、眼科镊子。　　3. 5%CO2孵箱、PH计、95%氧气源。　　4. 36电动恒温水浴。　　5. 培养液、各种缓冲液及添加剂DMEM高糖培养基、Hank’s缓冲液 、20%胎牛血清，转换生

1 材料 新西兰乳兔；新生牛血清、DMEM、Ⅱ型胶原酶。 2 方法 新西兰乳兔(雌雄不限，共18 只，分6 次处理)，溺死，置于75%酒精溶液中10 分钟，拿入超净工作台，自眼外眦至耳屏前剪开皮肤暴露皮下组织，再次严格消毒，自外眦外将颧弓由根部剪断，暴露髁状突，去净髁状突表

1 材料 1.1 动物 24 小时内新生的SD 大鼠10 只。 1.2 试剂 F12 完全培养液(含F12 培基、15%胎牛血清、青链霉素等)，0.25%胰蛋白酶，0.1%Ⅱ型胶原酶(Sigma， F12 培养基配置)。 1.3 器械 手术器械和磁力搅拌器。 2

1 材料 眼科剪刀 1 把，眼科镊子2 把，离心机，5 mL 小皿，10 mL 大皿，1×PBS 约200 mL，M199 培养液。 2 方法 2.1 在超净台内用10 mL 的离心管分装5 mL 的1×PBS(已高压灭菌)； 2.2 手术台上取患者发生动脉粥样硬化改变的

1 材料 手术剪 1 把、手术钳2 把、眼科剪刀2 把、眼科镊子 1 把、大头针4 个、手术刀片、无菌1×PBS 约500 mL，含20% FBS 的DMEM、5 mL 小皿3 个、 10 mL 大皿1 个、杀鼠板1 块。(以上均为无菌物品)。 2 方法 1. SD 大鼠

1 材料 成年同龄雄性新西兰白兔 2 只，体重约2.5~3 kg(购于南京军区南京总医院动物实验中心)，一只为正常成年雄性新西兰白兔，一只为膀胱出口不全梗阻8 周成年雄性新西兰白兔。DMEM、Ⅱ型胶原酶及α-平滑肌肌动蛋白抗体(α-SMA)；胎牛血清购于杭州四季青公司；胰蛋白酶

1 材料 1.1 动物 出生后1-4天的Wistar乳鼠1只。 1.2 试剂 PBS、培养液(Hyclone的低糖DMEM，含Hyclone的10%新生牛血清、100 U/ml青链霉素]、1%明胶PBS、0.25%胰酶(含EDTA，GIBCO)，碘酒和酒精绵球。 1.3

脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障(blood-brain barrier，BBB)的重要成分，与外周血管内皮细胞不同，它具有高跨内皮阻抗(transendothelial electrical resistance，TER)、细胞间紧密连接、极少的胞饮小泡、缺乏窗孔结构以及含有选择

1 材料 1.1 动物 雄性Wistar大鼠，体重60g±10g。 1.2 试剂 M199(Hyclone)，DMEM(Hyclone)，胎牛血清(Hyclone)，内皮细胞生长因子(ECGF，ROCHE)，肝素钠，青链霉素(HyClone)，明胶(Sigma)，Ⅱ型胶原