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干细胞在培养过程中如果环境不适合其生长就会出现部分细胞的老化现象。这是干细胞培养的一个难点也是经常出现的问题。 干细胞老化表现： 细胞胞浆内特别是在核区附近出现黑色颗粒，表示细胞开始出现老化； 细胞胞浆内出现空泡，则表明该细胞已老化或者已经开始分化（在全部细胞中出现少数老化

安世民, 曾桥, 滕祥云, 龙志高, 李娟, 潘乾, 邬玲仟, 梁德生, 夏昆, 夏家辉, 张灼华 中南大学医学遗传学国家重点实验室, 长沙410078 摘要: 通过人胚胎干细胞(Human embryonic stem cells, hESCs)经体内分化获取间充质干细胞(

Hippocampal Neuron Cultures (and mixed cortical cultures) Submitted by: Jean Siao, Ph.D. Begin by timing the pregnant mouse at E17-E19 day

1 材料 1.1 动物:孕16 d SD 大鼠。 1.2 液体配制:硼酸硼砂缓冲液：0.05 M 四硼化钠45 ml，0.2 M 硼酸55 ml，pH8.4；胰酶-EDTA 消化液(胰酶0.125 g，EDTA 0.2g，D-Hanks’平衡盐液定容至100 ml)；所用的培

潘永英彭书崚赵一凡王寿平 摘要：目的：建立SD大鼠海马神经元的分离、培养方法，为进行海马神经元的体外研究提供技术支持。方法：分离18D胎龄SD大鼠胎鼠的海马区，经机械吹打，细胞计数后，采用无血清培养基接种于24孔板。每天在显微镜下进行神经元的形态观察。第7天用SABC免疫组化染

1.孕18天（E18d）SD大鼠。 2.培养板处理，每孔加0.01％多聚赖氨酸（PDL）盖没底部，过夜移去。 3.无菌水洗2次后，加DMEM＋10％BS培养液平衡。 4.SD大鼠戊巴比妥麻醉，先用碘酒消毒大鼠腹部，再用75％乙醇消毒，切开子宫取胎鼠，移入超净台中，去除胎盘和

1 材料 1.1 动物：各个品系的小鼠2-4 只。 1.2 试剂：RPMI1640 培养基(含酚红)，小牛血清，双抗，培养液(10%小牛血清、RPMI1640、双抗)，台盼兰等。碘酒绵球和酒精绵球。 1.3 器械：一次性注射器、手术器械。 2 方法 如果采用刺激物，则可

1 材料 1.1 滑膜组织：将外科手术切下的组织在手术台上请护士将标本放入低温生理盐水中，在手术完成时将标本放入PBS 冰水液中并放入消毒的容器中带回实验室。 1.2 试剂：4 mg/mlⅠ型胶原酶(α-MEM 配制)，培养液(含10%胎牛血清的α-MEM)。 1.3 器械

1 材料 1.1 动物：雄性SD 大鼠(体重250-450 g)。 1.2 试剂：戊巴比妥钠，小牛血清(或胎牛血清，则更好)，DMEM，酶消化液I、Ⅱ(以HBSS配)，18%Nycodenz(以GBSS配)，D-Hanks’ 液(KCl 0.4 g/L，KH2PO4 0.06

1 材料 猪甲状腺由锦州市屠宰场提供。F-12 培养基(Sigma 公司)；胎牛血清(天津血液研究所)；胰蛋白酶(Sigma 公司)；胶原酶Ⅳ(Sigma 公司)；牛TSH(Sigma 公司) 2 方法 杀猪后迅速取出甲状腺 1～2 个，置于盛有75%酒精的烧杯中，用冰盒送