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聚蔗糖-泛影葡胺法分离嗜碱性粒细胞
【试剂及配制】 (1) 聚蔗糖-泛影葡胺分层(D=1.085) (2) HEPES-ACM缓冲液:HEPES 25mmol/L中含CaCl2 1mmol、 NaCl 130mmol、 KCl 5mmol、 MgCl2 1mmol,用1mol/L NaOH调节至pH7.4。
2010-02-23
盘选(Panning)分离法分离T细胞亚群
聚苯乙烯表面可以用作亲和性试剂的不溶性基质,以分离淋巴细胞亚群.聚苯乙烯培养皿首先用纯化的羊抗鼠IgG抗体包被,然后将鼠抗人(如抗CD4或抗 CD8单抗)与T细胞反应的细胞悬液加入培养皿中,孵育一段时间后,对CD4或CD8抗原特异的T细胞即结合到平皿表面,而CD8+或CD4+细胞
2010-02-23
免疫磁性微珠分离法分离T淋巴细胞和B淋巴细胞
【材料及试剂】 (1)磁性激活细胞分离器(MACS):MACS柱(C型,可结合2×108个细胞)生物素标记的抗CD4单抗和抗CD8单抗 (2)生物素标记的羊抗鼠IgG F(Fab,)2 (3)FITC标记的亲和素 (4)生物素标记的磁性微珠 (5)MACS柱染色洗涤液、
2010-02-23
FluoroBeadsR分离T淋巴细胞和B淋巴细胞
【原理】 免疫磁性微珠表面联结着单克隆抗体的超顺磁性微珠。这些微珠在磁场中能够聚集在一起。当移去磁场时,这些磁珠不残留任何磁性。它们能再被磁化和分散。连接的单克隆抗体的特异性决定着结合细胞的类型。 分离T细胞 【原理】 T 荧光微珠提供了一个利用荧光染色进行Ⅰ型HLA 分
2010-02-23
羊水细胞原位培养法
李锦霞汪安琦汤火顺 (中国科学院遗传研究所,北京) 自从Steele和Breg[4,应用等量的TC199和 Eagle培养液,加12%小牛血清和12%人血清最先培养羊水成功,并用于胎儿染色体疾病的产前诊断之后,此项技术已成为产前诊断的一个重要手段。然而,羊水细胞是胎儿皮肤等的
2010-02-23
提高羊水细胞(amniotic fluid cells)培养成功率的方法
摘要:目的 提高羊水培养的成功率。 方法 正常羊水保留换液标本,以备复查;异常羊水采用细胞分离技术提取羊水中的有效细胞成分;及时发现污染羊水并进行抗菌处理。 结果 提高了羊水培养的成功率(99·4% )并缩短异常羊水的培养时间,解决了部分污染羊水的污染问题(2/3)。 结论
2010-02-23
大鼠成体心肌细胞(adult rat cardiomyocytes)的分离和培养
【摘要】 目的: 探索稳定的大鼠成体心肌细胞的分离和培养方法. 方法: 应用主动脉逆行生物酶(5 g/L胰蛋白酶及1 g/L胶原酶)灌流法分离大鼠成体心肌细胞,免疫荧光染色法鉴定分离的心肌细胞,比较有无血清培养对心肌细胞的影响. 结果: 心肌细胞的存活率为95%以上;存活细胞呈
2010-02-23
细胞克隆化培养技术—有限稀释法
细胞克隆化培养技术—有限稀释法(limiting dilution analysis,LDA)一、实验目的: 1、掌握用有限稀释法进行细胞克隆化培养技术; 2、学会细胞克隆形成的辩观察技能; 3、配合抗体分泌细胞筛选技术,确定抗体分泌细胞。 二、实验原理: 克隆化培养即
2010-02-24
贴壁细胞培养过程中支原体污染的几种救治方案疗效比较
支原体是细胞培养中最常见、不易被察觉和干扰实验结果的污染物,约有30.3%~50.5%的细胞培养物中有支原体污染。培养细胞中支原体污染的来源包括:所使用的动物来源的一些产品如血清或已被支原体污染的细胞株系。细胞培养上清液中支原体的浓度可达107个/ml,而培养的细胞看起来很正
2010-02-24
细胞传代培养步骤——动物细胞培养
细胞传代培养原理: 传代培养是组织培养常规保种方法之一。也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶,细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行,每一步都需要认真仔细的无菌操作。 细胞
2010-02-24
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