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用多聚甲醛固定细胞爬片、甩片或切片
当纯净甲醛在水溶液中溶解时,会自动聚合成长链的多聚甲醛。其长度不一,在水中同时进行聚合与解聚反应。甲醛易溶于脂类物质,因此能穿过细胞膜进入细胞内。用多聚甲醛固定细胞时,能使细胞内的自由氨基基团发生化学交联。当不同的分子发生交联时,形成一网状结构,把细胞的各个结构成分连接起来。
2010-02-24
细胞爬片和细胞甩片的制备
(一)细胞爬片的制备 (1)如果使用载玻片或盖玻片,必须在使用之前灭菌。可以一次灭菌并贮存在无菌状态下。如果使用少量的盖玻片,用金属镊子夹住盖玻片,在70% 乙醇中浸泡,然后在火焰上烤干。要轻轻地镊取,以防破裂。为了方便起见,可以将盖玻片浸泡于70%的乙醇中,使用时放在火焰上处
2010-02-24
肿瘤细胞培养方法简介
一、机械刮除法 1.标记:镜下观察,用不脱色笔在培养瓶皿的背面圈下生长肿瘤细胞的部位。 2.刮除:弃掉培养液,把无菌胶刮伸入瓶皿中,肉眼或显微镜窥视下,刮除无标记空间。 3.用Hanks液冲洗一两次,洗除被刮掉的细胞。 4.注入培养液继续培养,如发现仍有成纤维细胞残留,可
2010-02-25
细胞原代培养
一、原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培 养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。 二、仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃
2010-02-25
细胞培养(cell culture)
生物体是一个高度统一的整体,而细胞生物学的主要对象是生物体内的各种细胞,很显然,在整体条件下研究单个细胞或某一细胞群在体内(in vivo)的功能活动是非常困难的。在实际工作中,人们常常从生物体内取出组织或细胞,在体外(in vitro)模拟体内生理环境,在无菌、适当温度和一定营
2010-02-25
磷酸钙-DNA共沉淀法(贴壁细胞转染)
核酸以磷酸钙-DNA共沉淀物的形成出现时,可使DNA黏附在细胞表面,利于细胞吞入摄取,或通过细胞膜脂相收缩时裂开的空隙进入细胞内,进入细胞的DNA仅有1%-5%可以进入细胞核中,其中仅有不到1%的DNA可以与细胞DNA整合,在细胞中进行稳定表达,基因转导的频率大约为10-4,这项
2010-02-26
正常小鼠原代真皮纤维原细胞培养
PriCells –正常小鼠原代真皮纤维原细胞培养 一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement 2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% D
2010-02-26
动物细胞培养(animal cell culture)
细胞培养是用无菌操作的方法将动物体内的组织(或器官)取出,模拟动物体内的生理条件,在体外进行培养.使其不断地生长、繁殖,人们借以观察细胞的生长、繁殖、细胞分化以及细胞衰老等过程的生命现象。 细胞培养的突出优点,一是便于研究各种物理、化学等外界因素对细胞生长发育和分化等的影响;二
2010-02-26
植物细胞组织培养(Plant tissue and cell culture)
一.实验目的 植物细胞和组织培养的技术性强,要求无菌操作,通过本实验可初步掌握常规的组织培养技术,加深对无菌操作的了解。 二.实验原理 植物的全能性:植物体的任何一个细胞都具有生长分化成为一个完整植株的能力,称为植物的全能性。 植物组织培养就是利用植物的全能性进行离体无菌
2010-02-26
微血管内皮细胞的体外分离培养方法概述
段慧琴1,张永东2,穆 祥1* (1.北京农学院动科系,北京 102206;2.北京农业职业学院,北京 102442) 摘 要:微血管内皮细胞在许多病理生理过程中起着关键性的作用。应用体外培养的微血管内皮细胞,不仅广泛应用于微循环系统对不同生理或病理刺激的反应,也可阐明伴随微
2010-02-28
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