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魏运军,张学渊　　(第三军医大学附属西南医院耳鼻咽喉科,重庆400038) 　　提　要: 目的　建立稳定可靠的耳蜗微血管内皮细胞分离培养方法。方法　采用显微解剖法分离出耳蜗血管纹,组织块培养法进行体外培养。结果　接种后2 d ,部分组织块边缘有散在的细胞生长,之后细胞数逐渐增多

1．取出生后1-3天内的大鼠脑组织后，先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分，置入Hanks液中漂洗1～2次后，置于30～50倍的Hanks液中，脑组织比较柔软，反复吹打即可制成细胞悬液。 2．为排除脂肪成分和其它碎块，把悬液注入离心管中，在室温直立5～10分钟后，细胞或细胞团块自然下

细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点，一是研究对象是活的细胞，可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等；二是可以人为地严格控制研究条件，便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响，有利于单因子分析；三是研究的样本

（一）细胞的计数方法 细胞计数一般用血球计数板，按白血球计数法进行计数。 操作方法如下： 1．首先取待稀释的细胞悬液1ml加4ml生理盐水（或Hank液）作5倍稀释。 2．先将特制的盖玻片放在血球计数板上，使两侧均现带色牛顿环。用血色素吸管（或细胞管）取少量待测细胞悬液，

摘要：预防和避免污染是细胞培养成功的关键，黑胶虫（也称黑焦虫）是近几年来几乎出现在每个细胞培养实验室。但是现在无法对黑胶虫的确认和鉴别，导致学术界说法不一，笔者收集了关于黑胶虫的资料，对黑胶虫进行类系统描述，对黑胶虫出现的情况对细胞培养的影响以及黑胶虫污染后的有效处理进行介绍。

动物细胞体外培养的历史可追溯到1907年，美国生物学家Harrison在无菌条件下，以淋巴液为培养基成功地在试管中培养了蛙胚神经组织达数周，创立了体外组织培养法。1962年，其规模开始扩大，随着细胞生物学、培养系统及培养方法等领域的不断丰富和完善，动物细胞培养技术得到了很大的发展

细胞的生长、繁殖和代谢等生理性质，在很大程度上受各种环境因素的影响。为了使动物细胞反应处于最佳状态，了解环境因素对其影响无疑是很重要的。影响动物细胞生长、繁殖的环境因素很多，主要有细胞生长的支持物、气体交换、培养温度、pH、渗透压及其它因素等方面。 1、支持物 体外培养的大多

植物细胞培养是在植物组织培养技术基础上发展起来的。1902年Haberlandt确定了植物的单个细胞内存在其生命体的全部能力(全能性)，使成为植物组织培养的开端。其后，为了实现分裂组织的无限生长，对外植体的选择及培养基等方面进行了探索。20世纪30年代，组织培养取得了飞速的发展，

张文炜 徐列明 【关键词】 分离和提纯； 细胞培养，方法; 人肝星状细胞 An effective method of isolating and culturing human hepatic stellate cells ZHANG Wen-wei, XU Lie-mi

〔摘要〕　目的　建立一种简便有效的体外分离纯化及培养扩增大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs) 的方法。研究MSCs 的生物学特性, 为血管组织工程提供理想的种子细胞。方法　贴壁培养法分离纯化大鼠MSCs体外培养和连续传代, 在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化; 利用MTT法测定MS