羊水细胞原位培养法

2010-02-23 16:10 · Aries

李锦霞汪安琦汤火顺 (中国科学院遗传研究所,北京) 自从Steele和Breg[4,应用等量的TC199和 Eagle培养液,加12%小牛血清和12%人血清最先培养羊水成功,并用于胎儿染色体疾病的产前诊断之后,此项技术已成为产前诊断的一个重要手段。然而,羊水细胞是胎儿皮肤等的

李锦霞汪安琦汤火顺

(中国科学院遗传研究所,北京)

自从Steele和Breg[4,应用等量的TC199和 Eagle培养液,加12%小牛血清和12%人血清最先培养羊水成功,并用于胎儿染色体疾病的产前诊断之后,此项技术已成为产前诊断的一个重要手段。然而,羊水细胞是胎儿皮肤等的脱落细胞,大部分是固缩的,死亡的,只有一部分是活细胞,且随着妊娠周数而变化[[s1,不同妊娠周数的羊水中所含活细胞数的多少及血清的质量133和带血的羊水样品〔幻均可直接影响培养结果。因此要获得羊水细胞的培养成功是不容易的。经过培养方法的不断改进,成功率由 19外提高到97多121。我们在1977年应用简易羊水细胞培养法,获得了成功[", 1980年6月间我们吸取了国外的先进技术,结合本实验室的条件,开展了co,培养箱中羊水细胞原位培养法,取得成功。

材料与方法

(一)取材 在无菌条件下,经腹羊膜腔穿刺,抽取妊娠15-20周孕妇的羊水10- 15m1,分装二个离心管内备用。一般在取材后 24小时内进行培养,效果较好。

(二)羊水细胞培养 1.培养基为混合培养基,其中含Flo培养液70 ,小牛血清30 ,在每ml混合培养掖中,加100单位青霉素和100/zg链霉素。培养基的pH为7.0-7.20

2.培养瓶我们采用的是容量为50ml 的无菌塑料瓶(图版1, 1),实际有效培养面积为40 X 65mm',瓶口用小塑料螺旋盖,放人co2>

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