• 293细胞培养(cell culture)技术

    1、293细胞明显适应酸性环境,pH值在6.9~7.1时,可顺利贴壁生长, 换液时动作要轻。一般用高糖的DMEM培养基。 2、传代:倒去废液,PBS洗一次(轻),用0.02%EDTA与0.25%Trypsin消化,生长良好细胞,培养瓶中轻摇,使之流遍所有细胞表面,即将其吸除或弃
    2010-02-11
  • 外周血中嗜碱性粒细胞(BASO)分离方法

    Percoll密度梯度离心分离法: 1、Pcrcoll混悬液的配制:Percoll 90ml,HBSS 9ml, HEPES(0.25mol/l)1ml(PH 7.3),HCL(1mol/l)0.4ml 调节至PH7.4 2、制备Percoll密度梯度管 密度 Percol
    2010-02-11
  • 大鼠心肌细胞(Rat Cardiac Myocytes;RCM)分离

    大鼠心肌细胞比乳鼠心肌难养,用无血清培养基,呈杆状,横纹清楚,在培养基里细胞不搏动。 大鼠心肌细胞分离一般是采用二型胶原酶分离,浓度为1mg/ml(用无钙台氏液配制),同时酶液里加入牛磺酸,BSA。一般采用 Langendorff灌流的方法,大鼠开胸后,迅速取出心脏,放入冰的台
    2010-02-11
  • Generation of Epstein-Barr Virus (EBV)-Immortalized B Cell L

    Immortalization of B lymphocytes by EBV is an effective procedure for inducing long-term growth of certain human B lymphocytes. The basic pr
    2010-02-11
  • 原代胎儿肾小球系膜细胞培养方法步骤

    取引产胎儿肾,无菌操作,1小时内完成。2用生理盐水冲洗干净。 取肾皮质,用小外科剪剪成碎麽。依次研磨过80目,100目,200目筛网,不断用生理盐水冲洗,最后在200目筛网上收集肾小球, 先用0。4%的胶原酶四消化半小时,接种于50ML的培养瓶里,加含有20%小牛血清的DME
    2010-02-11
  • 外周血培养基配制方法

    一、配制用水培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。 二、培养基培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配
    2010-02-11
  • 肿瘤细胞的原代培养方法

    肿瘤细胞的原代培养方法(组织块法.酶消化法.钽网法与脱落细胞法)肿瘤细胞对培养基的要求不如正常细胞严格,一般常用RPMI、DMEM、McCoy-5A等培养基,血清浓度不高,10%即可,建议最好在原代培养时能加入生长因子或原患者血清(1%-2%)以利细胞生长。培养方法很多,主要有组
    2010-02-11
  • 如何预防细胞培养(cell culture)的污染问题

    体外培养的细胞受到严重污染时,有时即使想尽各种办法也难以挽回。因此,防止污染,预防是关键。只有将预防措施贯穿于整个细胞培养的始终,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手: 1、从物品、用品消毒灭菌着手 细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌
    2010-02-11
  • 胶质瘤(glioma)干细胞培养

    胶质瘤是颅内最常见的肿瘤,病因不清。切除后容易复发,放射治疗和化疗效果不理想。近年来从成年的脑组织中可以培养出神经干细胞,传统的观点认为,胶质瘤中只含有胶质细胞,没有神经元。近期的研究证明,胶质瘤在体外分化为神经元和星形胶质细胞,证明了胶质瘤中存在干细胞的可能性。这种细胞能够同时
    2010-02-11
  • 胚胎干细胞中饲养层细胞的原代培养实验材料和步骤

    实验材料 12.5d孕鼠、PBS、DMEM、血清、酒精、双抗、解剖器、培养箱、超净台 实验步骤 1.性成熟小鼠合笼(♀∶♂=2∶1) 2.每天观察小鼠,见阴道栓后确定为怀孕0.5d。 3.取12.5d孕鼠,断颈处死,在酒精中泡数秒消毒。控干酒精后置于一个无菌的培养皿中。
    2010-02-11