• 心肌细胞(cardiomyocyte)的分离及培养材料和过程

    器械: 饭盒、烧杯、弯头解剖剪(2)、小镊子(2)、平皿(4)、毛玻片、滤网、离心管(15ml)、移液管、培养瓶、废液缸、PE手套、橡胶手套、冰盒 溶液: PBS、DMEM(含血清)、DMEM(free)、胰酶 动物: 小鼠 准备: 用酒精棉球擦拭台面后把物品摆放好
    2010-02-11
  • 肝细胞原代培养(primary culture of liver cell)操作步骤

    材料: 小鼠 器具: 饭盒、纱布、小剪子、小镊子、大镊子、大烧杯、平皿、研磨玻片、滤网、离心管(15/50ml)、6孔培养板、吸管、移液管、手套、微量加样器 试剂: DMEM(含血清)、无血清DMEM培养基、胰酶、PBS 准备: 酒精擦拭台面后把物品摆放好,开紫外线
    2010-02-11
  • 大鼠脑微血管内皮细胞的分离与原代培养仪器试剂和步骤

    脑微血管内皮细胞是构成血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)的重要成分,与外周血管内皮细胞不同,它具有高跨内皮阻抗(transendothelial electrical resistance,TER)、细胞间紧密连接、极少的胞饮小泡、缺乏窗孔结构以及含有选择
    2010-02-11
  • 细胞培养污染图片

    白色念珠菌污染 革兰氏染色阳性 中间长梭型的是正在分裂的念珠菌
    2010-02-11
  • 两种大鼠卵巢颗粒细胞(Granulosa cell)的分离方法

    大鼠颗粒细胞的分离方法一: 分离23天的SD大鼠,皮下注射DES(2.5 mg/只),连续三天。于最后一次注射24 h后,颈椎脱臼处死动物。无菌收集两侧的卵巢,置于盛有PBS的EP管中清洗。将PBS清洗的卵巢放在盛有培养基的平皿中,在体视显微镜下,用25号针头刺破卵泡,释放出颗
    2010-02-11
  • 血清[serum]质量决定因素和使用建议

    一、关于血清使用的几点建议: 1、血清必须贮存-20℃,如存放于4℃,请勿超过两周,对于某些单位一次无法用完一瓶,可在无菌条件下将其40-45ml分装于无菌50ml离心管中(或血清瓶中),由于血清解冻时体积会增加10%,必须预留此膨胀体积的空间,否则易发生污染或容器冻裂的情形。
    2010-02-11
  • 细胞株(cell line)的培养、冻存与复苏

    1、细胞株的培养和传代 培养: 用于检测细胞因子的细胞株通常培养于含10%小牛血清和抗生素的培养液中,培养细胞因子依赖细胞株还有加入适量细胞因子。在37℃ 5% CO2的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养,3~4天传代一次。 悬浮生长细胞的传代: 直接直接吸去或离心后吸去培养上
    2010-02-11
  • 基底动脉平滑肌细胞(smooth muscle cell)原代培养方法

    培养液:MEM(GIBCO),20%FBS,双抗100IU/ml; 原代细胞培养:取5kg左右兔空气栓塞法处死后断头,于无菌条件下从枕大孔处用大止血箝扳开颅骨暴露并小心取出脑组织放入装有DMEM的培养皿中,用眼科镊分离基底动脉后按常规平滑肌方法贴块培养。 传代: (1)吸除
    2010-02-11
  • 乳腺腺癌细胞系SK-BR-3的传代方法

    刚开始养SK-BR-3时,细胞状态不是很好,贴壁也不均匀,于是开始想办法,考虑是不是吹打的不够,或是传得过多,或是其它的什么,后来发现的确如此,细胞的生长状态与传代的方法有很密切的联系。 我的传代方法是: 以50平方厘米培养瓶为例,待细胞长满瓶底70%-80% 1 、吸除或
    2010-02-11
  • 肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell)的分离步骤

    一、取得完全无血液残留的肺脏: 实验前j将大鼠全身血液放净,取得完全无血液残留的肺脏 二、消化肺组织: 常用于细胞消化的酶有胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。胰蛋白酶是最早用于消化、分离上皮细胞的酶,现在一般用损伤性小的弹性蛋白酶来替代胰蛋白酶。但这种酶却有活性不稳定,有效作用
    2010-02-23