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一、培养基的历史 体外培养（in vitro culture）包括：组织培养（tissue culture）、细胞培养（cell culture）、器官培养（organ culture）。顾名思义，就是将活体结构成分（如活体组织、活体细胞或者活体器官等）从体内或其寄生体内取出，

贴壁法原代培养 1.1　细胞培养 1.1.1　培养液配制　DMEM（美国Gibco公司），Hepes（15mmol/L），青霉素（100u/ml），链霉素（100mg /ml），优质胎牛血清（原代培养浓度20%，传代培养浓度10%，美国Hyclone）。 1.1.2　培养器

细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具，形状、规格、用途多样，你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫？你是否正为如何方便、正确的使用培养板而苦恼？你对如何处理培养板是否也有困惑？对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会？ 细胞培养板的选择： 细胞培养板依底部形状的不同可分为

某网友认为： （1）细胞冻存管一般有1.5-2ml左右体积，原则上可以存放1.5ml充满均匀悬浮细胞的冻存液，一些人喜欢灌注1-1.5ml冻存液冻存，这实际上并不好。原因如下：冻存液冻存需要一段时间，如果这段时间冻存管倾斜，液体容易流到管口，很容易在后续的操作中造成污染。建议0

1.如果财力允许，培养基一定要买已经配好的，因为ph值对细胞影响很大，并且很多时候对于新手来说，即使细胞培养失败你是找不出合理的理由的。所以尽最大可能减少不稳定因素的影响！ 2.我通过实践证明培养基最好是DMEM与1640混合再一起使用，比例大概就是1：1,这样你会发现即使培养

细胞培养中常见的污染情况总结如下: 常见的污染如下： 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管

消化法原代培养兔胸主动脉平滑肌细胞 用DMEM配0.2%的1型胶原酶（用20的血清的DMEM配可能更好，有类似文献），分装于青霉素小并，每并2-3ml。1只免的胸主动脉置于1 瓶消化液中消化，消化约10几个小时（消化程度的把握要体会），离心后，接种（若见细胞量大，成功把握大），

一、酶消化法 1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25% 的胰酶作用于单层贴壁的细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含钙、镁

细胞培养名称：新生大鼠皮质星形胶质细胞培养 组织来源：种属：大鼠 年 龄：新生1天-2天 取材部位： 皮质 选用的酶：0.125%胰酶 消化时间：37度15min 注意事项：胰酶平时用1.5ml EP管分装冻存，用时解冻，37预温1min，以保持胰酶好的活性，消化时每

巨噬细胞培养 巨噬细胞属免疫细胞，有多种功能，是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得，便于培养，并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群，在条件适宜下可生活2－3周，多用做原代培养，难以长期生存。 巨噬细胞也建有无限细胞系，大多来自小鼠，如P331、S7