大鼠海马神经元的原代无血清培养及鉴定

2010-02-22 09:55 · queen

潘永英彭书崚赵一凡王寿平 摘要:目的:建立SD大鼠海马神经元的分离、培养方法,为进行海马神经元的体外研究提供技术支持。方法:分离18D胎龄SD大鼠胎鼠的海马区,经机械吹打,细胞计数后,采用无血清培养基接种于24孔板。每天在显微镜下进行神经元的形态观察。第7天用SABC免疫组化染

潘永英彭书崚赵一凡王寿平

摘要:目的:建立SD大鼠海马神经元的分离、培养方法,为进行海马神经元的体外研究提供技术支持。方法:分离18D胎龄SD大鼠胎鼠的海马区,经机械吹打,细胞计数后,采用无血清培养基接种于24孔板。每天在显微镜下进行神经元的形态观察。第7天用SABC免疫组化染色法检测神经元特异性烯醇化酶的表达。结果:采用B27无血清培养基,神经元生长良好,第7天神经元纯度达95%以上。结论:机械分离无血清培养神经元的方法具有简便可行,结果稳定的优点,可作为神经元体外培养的良好模型,值得推广应用。

关键词:神经元海马培养基,无血清细胞,培养的

神经元体外培养模型是神经元发育分化、神经再生、神经疾病的发生机制等众多研究领域的重要模型。国内从1960年代培养脑神经细胞以来,神经细胞的培养方法逐渐增多,但总体可分为有血清培养和无血清培养两种,有血清培养血清可以提供细胞生长所必需的营养成分,可以促进细胞的增生和25’ 的合成,但由于血清成分复杂,对于要求较高的实验研究结果影响较大。而无血清培养步骤简便,培养的细胞活性及生理特性保持良好,具有较大的优越性。本课题组为了研究麻醉药物对海马神经元发育的影响,用无血清培养方法,建立了SD大鼠胎鼠的海马神经元体外分散培养模型,并对其进行了形态学观察,为今后的相关研究奠定了基础。

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