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RAPD分析的原理及操作技术
1 目的 分子标记是一类建立在分子水平上的遗传标记,它同样具有遗传标记的两个特点,即可遗传性和可识别性。广义的分子标记包括同工酶和DNA分子标记两类,狭义的分子标记则仅指后者。DNA分子标记通常是一些小分子量的DNA片段(几十到2000bp左右),它们大量存在于真核生物的基因组
2010-03-07
mRNA差别显示技术[DDRT-PCR]
随着PCR技术的发展,人们在此基础上建立起了一系列基于基因分离的新技术新方法。如mRNA差别显示技术(DDRT-PCR)、以及进一步改进的代表性差示分析(RAD),抑制性扣除杂交(SSH)和交互扣除RNA差别显示技术(RSDD)。 差别显示PCR是根据绝大多数真核细胞mRNA3
2010-03-12
mRNA差异显示技术[差示反转录PCR,DDRT-PCR]
mRNA差异显示技术是由美国波斯顿Dena-Farber癌症研究所的Liang Peng博士和Arthur Pardee博士在1992年创立的 [3]。它也称为差示反转录PCR(differential display of reverse transcriptional PC
2010-03-13
DDRT-PCR、AP-PCR与ARMS-PCR
1.DDRT-PCR(differential display reverse transcription PCR) 1992年,Liang等在AP-PCR和RT-PCR技术的基础上建立了mRNA差异显示(mRNA differential display,DD)或称差异显示反
2010-03-15
免疫PCR、TAS、再生式序列复制技术、LCR和PCR-SSCP分析技术
一、免疫PCR 所谓免疫(Immune PCR)就是利用抗体与DNA特异结合来检测抗原,把抗原抗体反应与PCR联合应用而建立的一种抗原检测系统。 在免疫PCR中,一个中介分子同时具有与DNA、抗体分子特异结合的能力。其一端连接DNA(标记物),另一端连接抗原-抗体
2010-03-17
反向PCR(reverse PCR)原理、程序和局限
反向PCR(reverse PCR)是用反向的互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段,而常规PCR扩增的是已知序列的两引物之间DNA片段.实验时选择已知序列内部没有切点的限制性内切酶对该段DNA进行酶切,然后用连接酶使带有粘性末端的靶序列环化连接,再用一对反向的引物进行PC
2010-03-17
原位PCR技术基本原理、类型、步骤和应用
在科学研究中,每一项新技术的创立都会带来一系列新的研究成果问世,从而推动着各学科的发展。纵观形态研究领域,50年代电子显微镜引入形态学观察领域,带来了从细胞水平到亚细胞水平的深入研究;60-70年代,免疫组织化学与免疫细胞化学技术的广泛应用,又将观察的水平由亚细胞结构推向了蛋白质
2010-03-17
荧光定量PCR技术特点、原理及其应用
荧光定量PCR(也称TaqMan PCR,以下简称FQ-PCR)是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术,该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针来实现其定量功能的,与变通PCR相比,FQ- PCR具有许多优点。本文拟就该技术的特点、
2010-03-18
定量PCR技术基本原理和方法以及PCR产物的检测与定量
聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是微量核酸扩增的有效工具,由于其灵敏、特异、快速等优点,在医学上已广泛应用与病毒、细菌病原体及遗传病、肿瘤的早期诊断。随着PCR技术的发展,特别是病毒或肿瘤的治疗监测、疾病的诊断、机体基因表达调控方面,不
2010-03-18
一种优化的PCR方法——降落PCR扩增目的基因
万 兵1 闫 杰2 季明春1 张利宁3 申厚凤1 陈志琳1 (1 ,扬州大学医学院,扬州,225001 ; 2 ,北京地坛医院,北京,100011) (3 ,山东大学医学院,济南,250012) 摘 要 目的:尝试用一种新的PCR 方法———降落PCR 扩增目
2010-03-18
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