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前言： 感染性疾病的最大特点是存在病原体。病原的检测在感染病学的诊断中占有极其重要的地位。聚合酶链反应（Polymerase Chain reaction PCR）是体外扩增特异性DNA或RNA片段的一种技术，通过PCR的扩增，样品中的靶DNA或RNA可以成千上万甚至百万

分子分类学 　　虽然用核酸序列数据进行分类研究的优点早已被承认，但序列比较数据的积累过 程都是繁琐的。PCR/？通用引物技术所提供的快速测序法促使分子分类学的范围扩展 到更多的类群。由序列中得出的均一数据为各种类群的生物提供了一个共同的系统发 育框图。序列数据同样也提供了过去的

王耿新 刘德亮 王志群 陈献业 山东省青岛市肿瘤医院 青岛 266042 聚合酶链反应（ Polymerase Chain Reaction, PCR ）又称体外基因扩增技术或 DNA 扩增技术。自 1985 年美国 PE-Cetus 公司的 K.B Mullis 等人首创了

自从1985年PCR技术首次应用于遗传病基因诊断以来，已有近百种遗传病可用PCR 技术进行诊断和产前诊断，利用 PCR技术诊断遗传病的途径有五个，①基因突变位点 的直接检出②筛查与遗传病③有关的点突变④遗传多态性标记连锁分析间接诊断⑤ 利用cmRNA逆转录为cDNA进行分析或直接

徐 丽 蔡俊鹏 (华南理工大学食品与生物工程学院，广东广州510640) 摘 要：为建立一种快速、经济、敏感的PCR检测方法，以直接检测出环境、海产品等中的靶基因，通过PCR扩增已知携带tlh和tdh基因的副溶血弧茵标准菌株，并和常规PCR方法比较，初步建立了茵落PCR技术；

一、RACE 的简介 　　目前,全长基因的获得是生物工程及分子生物学研究的一个重点。尽管已经有多种方法可以获得基因的全长序列，但在很多生物研究中，由于所研究的目的基因丰度较低，从而使得由低丰度mRNA通过转录获得全长cDNA很困难。近年来发展成熟的cDNA末端快速扩增(RACE

SMARTTM 5‘-RACE的原理是先是利用mRNA的3‘末端的poly(A)尾巴作为一个引物结合位点，以Oligo(dT)30MN作为锁定引物在反转录酶MMLV作用下，反转录合成标准第一链cDNA。利用该反转录酶具有的末端转移酶活性，在反转录达到第一链的5‘末端时自动加上3一

差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。但上述方法人多具有实验周期长、技术步骤烦琐且工作量大等特点。cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends，RACE）是一种基于PCR从低丰度的转录本中快速扩增cDNA的5'和3'

实验目的 •§1 了解PCR技术原理 •§2 了解DNA电泳技术 •§3 掌握技术操作要领 §1 PCR技术原理 •类似于DNA的体内复制。首先待扩增DNA模板加热变性解链，随之将反应混合物冷却至某一温度，这一温度可使引物与它的靶序列发生退火，再将温度升高使退火引物在

实验原理： 聚合酶链式反应（PCR，polymerase chain reaction）实质是体内DNA复制的体外模拟。当双链DNA变性为单链以后，DNA聚合酶以单链DNA为模版，并利用反应混合物中的四种dNTP，以与模板互补的寡聚核苷酸链为引物，合成新的DNA互补链。新合成的