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应用PCR技术扩增Hbβ基因实验原理、仪器试剂和方法
PCR(Polymerase Chain Reaction )是一种在体外特异的扩增基因的技术。由Kary.Mullis发明,该技术大大推动了分子生物学的发展,被认为是分子生物学发展的里程碑。Kary.Mullis分享了1993年诺贝尔化学奖。 复习细胞内DNA复制条件和过程。
2010-03-23
PCR基因扩增原理、材料和方法
一、原理 多聚酶链式反应(polymerase chain reaction , PCR)类似于DNA 的天然复制过程:经过变性、退火、延伸多次循环(图1 ) , DNA 扩增倍数可达2 n 倍。即 Y = ( 1 + X ) n 式中,Y 为DNA 扩增倍数;X 为扩增效
2010-03-23
PCR技术在骨肿瘤诊断及研究中的应用
骨肿瘤较罕见,恶性骨肿瘤只占全身恶性肿瘤的1%,男多于女,性别比约为1.6 ∶1,均好发于10-30岁间,良性者以骨软骨瘤最多,依次为骨巨细胞瘤、内生软骨瘤 等,恶性者以骨肉瘤最多,依次为软骨肉瘤、纤维肉瘤等.骨恶性肿瘤的发生机理目 前认为是癌基因显性作用与抗癌基因失活的结果,是
2010-03-24
PCR在病毒学(Virology)中的应用
甲型肝炎病毒 甲型肝炎病毒是甲型肝炎的病原体.甲型肝炎呈世界性分布,其传染源是甲型肝炎病人及病毒携带者.HAV主要随粪便排出,但在血液、唾液、胆汁和十二指肠液也可查出.本病的传播主要是通过粪--口途径,如经日常生活接触传播,经污染饮水或食物而传播.其中无黄疸型肝炎患者容易漏诊或
2010-03-24
PCR法检测乙肝病毒(HBV)
多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是一种模拟天然DNA复制过程,在体外扩增特异性DNA(或RNA)片段的新技术。本实验是将待检双链DNA经94℃高温变性成单链作模板,然后加入一对人工合成的寡核苷酸引物,引物分别与待扩增DNA片段的两端互补,
2010-03-24
PCR技术及其在临床诊断应用中的进展
一、病原体的定性及定量检测,PCR及其相关技术适用于病毒,细菌、寄生虫等所有病原体的检测,以下就SDA首批的四种病原体基因诊断项目加以说明。 1. PCR技术在结核菌检测中的应用及意义 结核菌基因诊断的意义主要表现在:a. 区分TB与其它分枝杆菌;b. 检测TB耐药基因;c
2010-03-24
PCR(聚合酶链反应)在HIV感染研究中的应用
八十年代以来由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染而引起的艾滋病(AIDS)因其严重的危害性而受到人们高度重视,力争早期诊断和寻求有效治疗是防止其广泛传播的关键所在.聚合酶链反应(PCR)具有敏感、特异和快速的特点,是检测病毒、评价病情进展和探讨发病机理的有效工具. 一、HIV的基因
2010-03-24
PCR技术在DNA工程中的应用
引言 对DNA片段在按特殊要求进行修饰上PCR技术提供了一种比原有技术更快更简单的 方法。因为与重组DNA技术相比,PCR技术本身就较为简单;而且它还可以通过化学合 成寡聚核苷酸引物的方法更为简便地改变DNA的碱基序列,而不需对DNA片段进行限制 性内切酶和连接酶操作;再者,P
2010-03-24
PCR技术的应用与微生物系统进化研究的发展
分类和进化研究是生物学中最古老的领域之一。过去的研究主要依靠生物体的形态,并辅以生理特征,来探讨生物间亲缘关系的远近,有人称之为经典的方法,它是一百多年来完成微生物分类的主要方法。经典的方法是随机的和不系统的,只适用于一些形态复杂的真核生物和较大的原核生物。现在,由于生物技术的不
2010-03-24
PCR技术与病毒性肝炎检验及病程跟踪
我国病毒性肝炎病人较多,其中以乙型肝炎及丙型肝炎最为突出,十亿人口中约有一亿乙肝病毒携带者,为世界乙肝携带者一半。对于病毒性肝炎感染标志物的检测,随着分子生物学的发展,方法得到不断更新,水平不断提高,越来越接近病原微生物的本质。目前在我国广泛应用的检测方法,称酶免疫测定法(EIA
2010-03-24
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