• 第二代差异显示系统与传统mRNA差异显示技术

    真核生物中,从个体的生长、发育、衰老、死亡,到组织的分化、凋亡以及细胞对各种生物、理化因子的应答,本质上都涉及基因的选择性表达。高等生物大约有30 000个不同的基因,但在生物体内任意细胞中只有10%的基因得以表达,而这些基因的表达是按事件和空间顺序有序地进行着,这种表达的方式即
    2010-03-22
  • 定量PCR原理、材料与方法

    一.原理 应用定量PCR技术,用一种标准作对照能够估计出一种特异性靶DNA或RNA分子的相对含量。 参照物: 在定量 PCR 中必须加入参照物,用来作为扩增系统的阳性对照,并作为未知样本定量的标准,且通过竞争性作用校正扩增系统内管间的扩增效率,使其具有可比性。参照物按其性质
    2010-03-23
  • 菌落PCR(Colony PCR)具体方法

    菌落PCR(Colony PCR)可不必提取基因组DNA,不必酶切鉴定,而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增,省时少力。建议使用载体上的通用引物。通常利用此方法进行重组体的筛选或者DNA测序分析。最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的插入片断大小。 具体方法:
    2010-03-23
  • Single-strand Conformation Polymorphism Analysis (SSCP)

    SSCP gel preparation: Assemble the gel casting apparatus first. Clean the casting glass with distilled water followed by ethanol to remove
    2010-03-23
  • PCR基因扩增实验原理、材料和方法

    实验目的 通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。 实验原理 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的方法,故又称为基因的体外扩增法。 在待扩增的DNA片断两侧和与其两侧互补的两个寡核苷
    2010-03-23
  • 荧光定量PCR实验指南

    第一部分 一、基本步骤: 1、目的基因(DNA和mRNA)的查找和比对; 2、引物、探针的设计; 3、引物探针的合成; 4、反应体系的配制; 5、反应条件的设定; 6、反应体系和条件的优化; 7、荧光曲线和数据分析; 8、标准品的制备; 二、技术关键: 1、目的基因(DNA和m
    2010-03-23
  • AFLP分子标记技术及其应用

    AFLP分子标记技术及其应用(AFLP,Amplified restriction fragment polymorphism) 孙 晓 鹏(北京师范大学生命科学学院生态学专业)摘 要:扩增片段长度多态性 (AFLP,Amplified restriction fragment
    2010-03-23
  • AFLP Protocol(扩增酶切片段多态性)

    Restriction digestion Master mix preparation: Prepare a master mix of the following per sample, plus 5 to 10% extra to allow for pipetting
    2010-03-24
  • Q-PCR(定量聚合酶链反应)测定技术及其临床应用

    PCR? PCR只是一个简单的不起眼玩艺 ——凯利·穆利斯(Kary Mullis) PCR只是一个概念,所发生的奇迹是:PCR概念变成了可操作的实验系统,变成了一项成熟的技术,后者又上升成为新的概念。 … 它最大的特点就是能不断推出新形式。 —— 摘自[Making
    2010-03-23
  • Tail-PCR:一种DNA侧翼序列分离技术

    罗丽娟1 ,2 ,施季森1 3 (1. 南京林业大学,江苏 南京 210037 ;2. 华南热带农业大学,海南 儋州 571737) 摘 要:在分子生物学研究中,基因克隆和分子杂交的探针制备等操作常需分离与已知DNA序列邻近的未知序列,热不对称交错PCR(简称TAIL-PCR
    2010-03-23