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蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理、仪器试剂和操作步骤
原理] 蛋白质在十二烷基硫酸钠(SDS)和巯基乙醇的作用下,分子中的二硫键还原,氢键等打开,形成按1.4gSDS/1g蛋白质比例的SDS-蛋白质多肽复合物,该复合物带负电,故可在聚丙烯酰胺凝胶电泳中向正极迁移,且主要由于凝胶的分子筛作用,迁移速率与蛋白质的分子量大小有关,因此可
2010-04-20
蛋白表达的SDS-PAGE检测
实验目的: 握蛋白质电泳检测常用技术:SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE),以及聚丙烯酰胺凝胶的考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Bl
2010-05-01
聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定IgG纯度
(一)原 理 由于聚丙烯酰胺凝胶的浓度可以按要求配制,因此可以形成“连续系统”和“不连续系统”两种电泳系统。“不连续系统”最大的特点在于大大提高了样品分离的分辨率。这种电泳的主要特点是:(1)使用两种不同浓度的凝胶系统;(2)配制两种凝胶的缓冲溶液成分及pH不同,并且与电泳槽中
2010-05-24
聚丙烯酰胺凝胶电泳原理特性和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳原理
聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺(acrylamide,简称Acr)和交联剂又称为共聚体的N, N-甲叉双丙烯酰胺(methylene-bisacrylamide,简称Bis)在加速剂和催化剂的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳简称PA
2010-05-24
血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳
原理 本实验利用聚烯酰胺凝胶作电泳支持物。电荷和分子大小不一的各种血清蛋白质通过浓缩效应、电荷效应、分子筛效应而被精细地分离。由于具有以上三种效应,所以此方法分离效果好,分辨率高。血清蛋白在醋酸纤维素薄膜电泳仅能分成5~7个组份,而在聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳中可分出12~30个组
2010-05-24
聚合酶链式反应及其在基因诊断中的应用
聚合酶链式反应于1983年由美国Cetus公司的K.Mullis发明,并和定点突变的发明者M.Smith一起荣获1993年度诺贝尔化学奖,为生命科学领域的研究开创了崭新时代。 一、PCR反应原理和反应过程 DNA的体外复制包括3个步骤: 变性(denaturation):9
2010-07-19
RFLP技术和RAPD技术
第一节 概 述 DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种(个体
2010-03-05
鸡基因组的PCR-RFLP分析
一、实验方法 1、鸡基因组DNA的提取 2、目的基因的PCR扩增 3、内切酶消化PCR产物 4、琼脂糖凝胶电泳(检测基因型) 鸡DNA的获取 1、鸡翅下静脉采集全血;2%EDTA抗凝; 2、DNA提取: 裂解细胞核(红细胞+白细胞) ↓ 酚-氯仿去除蛋白质
2010-03-15
PCR临床应用特点及应用领域
一、PCR应用特点 1.操作简便目前PCR技术采用耐高温Taq DNA聚合酶,并且在有电脑控制的DNA扩增仪中进行,使操作大为简化,一次加入的酶即可满足反应全过程。DNA扩增仪能自动迅速升降温度,只需把反应所需的全部材料混匀,置入仪器内,反应便依所输入的程序进行。 2
2010-03-17
转基因烟草的PCR检测
一 、材料、试剂和仪器 1 材料 基因特异引物,转基因烟草和野生型烟草的基因组DNA,含目的基因得质粒 2 试剂 PCR Kit 3 仪器 PCR仪(PE2400),电泳仪,紫外照相装置 二、 操作程序 1. 在灭菌1.5mL管中25μl灭菌ddH2O,,加入100ng
2010-03-17
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