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Methods for DNA sequencing
Bst DNA polymerase-catalyzed radiolabeled two-step sequencing reactions (26) are modified from those presented earlier (25) by altering the
2010-02-01
DNA测序常见问题分析及解决办法
常见 问题 具体情况 可能原因 处理办法 备注 样品 准备 问题 菌培养不好或失败 抗性不对或 菌体已死 核对抗性,尽可能提供载体信息和新鲜菌液。 . 菌培养条件特殊 重新提供新鲜菌液,或提供2ug纯化质粒。 质粒提不出 或产量很低 质粒拷贝数
2010-02-01
DNA序列分析技术介绍
物种的遗传多样性在本质上是DNA 一级序列的多样性。近年来,随着DNA 测序技术的迅速发展和日益普及,DNA 测序在遗传多样性的研究中正在起着越来越大的作用。本章将介绍目前在遗传多样性研究中常用的一种手动和一种全自动双链DNA 测序方法。 1 DNA 模板的制备 在遗传多样性
2010-02-02
重组表达载体pET-32a-His-APC10的序列测定
通过上述实验所构建的表达质粒pET-32a-His-APC10经限制性内切酶分析正确后,必须进行DNA序列测定,以获得序列完全正确的克隆。 1. 基本原理 目前应用的DNA序列测定方法有双脱氧法(Sanger法)和化学测序法(Maxam-Gilbert法),在变性聚丙稀酰胺凝
2010-02-02
菌落PCR在大规模基因组测序中的应用
唐晔盛1) 3李 英2) 朱静洁2) 胡 欣2) 林志新1) 韩 斌2) 洪国藩2) ( 1) 上海交通大学生命科学技术学院, 上海200240 ; 2) 中国科学院国家基因研究中心, 上海200233) 摘要 一种利用菌落直接PCR 扩增DNA 并用于测序的实验方
2010-02-03
焦测序技术及其在遗传分析中的应用
张晓丹1 武海萍2 周国华#1,2 1(中国药科大学生命科学与技术学院,南京210009) 2(华东医学生物技术研究所,南京210002) 摘 要 焦测序技术是一种新的实时DNA 测序技术。它在DNA 聚合酶、三磷酸腺苷硫酸化酶、荧光素酶和三磷酸腺苷双磷酸酶4 种酶的协同作用
2010-02-03
高通量DNA测序技术在生物学研究的应用
导读:有很多生物学工作者尽管知道高通量技术的大概原理,但是却以为它仅仅是更快而已。其实高通量DNA测序技术不仅仅是替换传统的测序技术,它有三大优点是毛细管测序法所不具备的。首先它把平行处理的思想用到极致,可以在几百万个点上同时阅读测序,所以它是快速高通量的技术,这一点是大家所熟知
2010-02-04
毛细管阵列电泳与规模化DNA测序
甄志成, 姚志建 (国家人类基因组北方研究中心) 摘要:根据10080份基因组DNA测序的结果,讨论了毛细管阵列电泳测序方法的技术特点,并对影响测序结果的一些因素进行了分析。在此基础上与平板凝胶电泳方法进行比较,显示了毛细管阵列电泳的优点。同时也对大规模测序技术环节之间的协调
2010-02-18
核酸和蛋白质序列分析
在获得一个基因序列后,需要对其进行生物信息学分析,从中尽量发掘信息,从而指导进一步的实验研究。通过染色体定位分析、内含子/外显子分析、ORF分析、表达谱分析等,能够阐明基因的基本信息。通过启动子预测、CpG岛分析和转录因子分析等,识别调控区的顺式作用元件,可以为基因的调控研究提供
2010-02-24
核酸序列的一般分析流程
核酸序列的一般分析流程 1.1 核酸序列的检索 http://www.ncbi.nlm.nih.gov:80/entrez/query.fcgi?db=Nucleotide 1.2 核酸序列的同源性分析 1.2.1 基于NCBI/Blast软件的核酸序列同源性分析 ht
2010-02-24
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