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滕晓坤①, 肖华胜①②* ① 生物芯片上海国家工程研究中心, 上海 201203; ② 国家人类基因组南方研究中心, 上海市-科技部共建疾病与健康基因组学重点实验室, 上海 201203 摘要 基因芯片与第二代DNA测序是两种重要的高通量基因组学研究技术, 对于揭示基因组的

Preparation of Single-Stranded Tailed Templates for 454 Sequencing Citation: Ruby et al., Cell 127: 1193-1207 (2006) This protocol adapts

The following protocol is based on our modifications of R. Kraft, J. Tardiff, K. S. Krauter, and L. A. Leinwand. Biotechn . 6(6):544-545, 19

This protocol gives M13 quality sequence when used with the Quick DNA Plasmid Prep. protocol D.2. 1、Solutions Denaturation Solution 　　2 M

[目的] 掌握双脱氧链终止法测定DNA序列的原理与方法 [原理] DNA聚合酶催化的DNA链延伸是在3’-OH末端上进行的。由于2’，3’-双脱氧三磷酸核苷酸(ddNTP)的3’-位脱氧而失去游离-OH，当它参入到DNA链后，3’-OH末端消失，使DNA链的延伸终止。 本

1. For double-stranded DNA templates: a. Denature template: 10ml DNA (5-10g or alkaline lysis mini prepDNA) 8ml ddH2O 　　2ml 2N NaOH 　　-i

Buffers and gel solutions Long Ranger: we started using this in early 1995. Great stuff; the best thing is that the gels are not sticky aft

DNA 序列分析技术是现代生命科学研究的核心技术之一，而双脱氧核苷酸链终止法(Sanger法)是目前使用最普遍的DNA 序列分析技术。在基于Sanger法的全自动DNA 测序技术中，测序反应产生的DNA 片段是荧光标记的，这些片段经过平板胶电泳或毛细管电泳得到分离，荧光分子被激发

MAXAM-GILBERT SEQUENCING A modified, abbreviated version of the Maxam-Gilbert sequencing is described. A complete description including the

在分子生物学研究中，DNA 的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等（1977）发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和 Gilbert（1977）发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大，但都是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一