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PCR(聚合酶链式反应):应用最广泛的先进分子生物学技术
分子生物学技术正以惊人的速度发展,特别是近20年来已经成为生命科学的一个主要的生长点。1976年cDNA克隆技术的建立,使分子生物学更加迅速广泛地渗透到医学各学科,发展了各学科的分子理论基础。1985年Mullis首先描述的多聚酶链反应( PCR, Polymerase Chai
2010-03-17
提高PCR产物的几种有效方法
李爱丽1 ,2 姜涛1 马峙英2 贾继增1 ( 1中国农业科学院作物品种资源研究所 农业部作物种质资源与生物技术重点开放实验室,北京100081 ; 2 河北农业大学农学院,保定 071001) 摘 要: 结合作者的工作实际,着重介绍了有效提高PCR 产物的几种方法
2010-03-17
免疫PCR(Immuno PCR)原理和改进及扩增产物的ELISA检测
免疫-PCR技术结合了抗原抗体反应的特异性和PCR的高敏感性,是一种极为敏感的抗原检测技术,并适合于各种微量抗原的检测。 荧光标记、酶标记和放射性同位素标记这三大抗体标记技术是目前免疫化学、免疫学以及分子生物学中应用最广的常规抗原检测手段,具有很高的灵敏度。但在早期癌抗原及
2010-03-17
实时定量RT-PCR、原位PCR与简并PCR的原理、方法和应用
姜怀春1 , 李 宏2 (1. 重庆工商大学学报编辑部,重庆400067; 2. 重庆教育学院生命科学与化学系, 重庆400067) 摘 要:介绍了实时定量RT - PCR的原理、方法和应用,包括SYBR Green I、Amp liSensor、L ightcycle技术和
2010-03-17
PCR-ASO分型技术标准
1 引物设计由美国Perkin-elmer公司合成引物末端标记有生物素 1.1 扩增体系 10×PCR buffer 5μl PCR引物 10μl 4×dNTP 10μl Taq polymerase 0.25μl DNA模板 10μl D、W 14.75μl Total 50μ
2010-03-17
定量PCR常见问题与解决方法
1.定量PCR仪的开关机顺序是怎样的? 按照正确的开关机顺序操作,有助于延长仪器的使用寿命,减少仪器出故障的频率。开机顺序:先开电脑,待电脑完全启动后再开启定量PCR仪主机,等主机面板上的绿灯亮后即可打开定量PCR的收集软件,进行实验。关机顺序:确认实验已经结束后,首先关
2010-03-17
PCR技术(PCR ,Polymerase chain reaction)
PCR (Polymerase chain reaction) 是用一对寡聚DNA作为引物, 通过加温变性-退火-DNA合成这一周期的多次循环,使目的DNA片段得到扩增。 由于这种扩增产物是以指数形式积累的,经25-30个循环后,扩增倍数可达106。 Dr. Karry M
2010-03-17
Mapping, PCR,& DNA Sequencing
Software for: Making Restriction Maps Designing PCR primers Assembling fragments, detecting SNPs, and managing raw sequence data For : G
2010-03-17
PCR常见问题分析及解决方案
PCR技术的发明 1983 Kary Mullis 发明 1985 开始有文章发表 1993 获诺贝尔奖 广泛用于分子生物学研究领域 变性--退火--延伸三个步骤 1.模板DNA的变性:93℃-95℃左右, 2.模板DNA与引物的退火(复性):Ta=Tm- 3~5
2010-03-17
PCR[polymerase chain reaction]技术总论
多聚酶链式反应(polymerase chain reaction)简称PCR技术,是80年代中期发展起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术。此法操作简便, 可在短时间内在试管中获得数百万个特异的目的DNA序列的拷贝,PCR技术虽然问世仅数年时间, 但它已迅速渗透到分子生物学的各
2010-03-17
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