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骨骼细胞染色体制备方法
1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度<1×106/ml),盖紧培养瓶,充分混均; 2. 水平培养12, 24, 48h(37℃); 3. 加入4-5滴秋水溶液,培养一定时间; 4. 离心3-4 min(2000 rpm); 5. 去除上
2010-03-01
骨髓染色体分析方法——快速法
1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度<1×106/ml),盖 紧培养瓶,充分混均; 2. 水平培养12, 24, 48h(37℃); 3. 加入4-5滴秋水溶液,培养一定时间; 4. 离心3-4 min(2000 rpm); 5. 去
2010-03-01
染色体制备过程中的滴片方法
样品:外周血,骨髓,羊水(消化法)及其它样品等 滴片方法: 1.载玻片:干的干净载玻片 2.滴片的细胞悬液量:每张载玻片1~2滴,每滴20~30ul 3.染色体分散时间:将滴有细胞固定悬液的载片放在Maxchrome抽屉中分散5分钟(>5分钟,不影响染色体分散度) 4.
2010-03-01
细胞核与线粒体的分级分离
【实验目的】 通过细胞匀浆和离心的方法分级分离细胞的组分,以了解其原理及过程。 【实验用品】 一、材料和标本小白鼠、冰块。 二、器材和仪器玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml 量筒、25ml
2010-03-01
细胞裂解液(Cell Lysis Solution)的制备
一、试剂准备 1、新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液: 150 mM NaCL 1% NP-40 (去垢剂) 0.1% SDS (去垢剂) 2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入) 2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前
2010-03-18
制备细胞裂解液(CELL LYSATE PREPARATION PROTOCOL)
实验流程: 1. 收集胰蛋白酶消化的细胞并离心,用PBS清洗。 2. 用100μl 裂解缓冲液冰浴溶解沉淀10min(每500000个细胞20μl裂解缓冲液)。 3. 10000rpm,4°C离心10min,取上清转移至新管。 4. 用考马斯亮蓝法检测蛋白质浓度。 5.
2010-03-18
植物原生质体(protoplast)的制备
一、实验目的 原生质体是指植物细胞去掉细胞壁的裸露部分。它在培养条件下,①具有再生细胞壁,进行连续的细胞分裂并再生成完整植株的能力;②具有摄取外源大分子、细胞器,以及细菌,病毒的能力,因此是进行遗传操作,基因转移的好材料;③通过同种和异种植物的原生质体融合,可产生异核体,实现体
2010-03-28
动物染色体标本的制备
一、实验目的 1. 了解染色体标本制备的基本原理 2. 掌握滴片法制备染色体标本的一般步骤 二、实验原理 每一物种的细胞一般都具有一定数目、形状和大小的染色体,在秋水仙素的作用下可使分裂细胞阻断在中期,此时染色体形态最典型,然后通过低渗、固定、染色等步骤,便可在显微镜下呈
2010-03-28
细胞膜的通透性观察实验原理和操作步骤
一、实验目的 1.了解细胞膜对物质通透性的一般规律。 2.了解溶血现象及其发生机制。 二、实验原理 细胞膜是细胞与环境进行物质交换的选择通透性屏障。它是一种半透膜,可选择性控制物质进出细胞。各种物质出入细胞的方式是不同的,水是生物界最普遍的溶剂,水分子可以按照物质浓度梯度
2010-03-28
动物骨髓细胞染色体的制备与观察
[实验目的] 1. 通过青蛙或小白鼠骨髓细胞染色体的制备,初步掌握低渗法制备动物骨髓细胞染色体的方法。 2. 熟悉染色体的形态、种类及青蛙、小白鼠等动物染色体的数目或类别。 [实验原理] 骨髓细胞是具有旺盛分裂能力的细胞,从这些分裂细胞中,可观察到处于分裂中期的染色体,能
2010-03-28
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