• 亚细胞结构(subcellular structure)分离的技术

    分离亚细胞组分的第一步是制备组织匀浆或细胞匀浆。匀浆(Homogenization)是在低温条件下,将组织或细胞放在匀浆器中加入等渗匀浆介质(即0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙溶液)研磨,使细胞被机械地研碎成为各种亚细胞组分和包含物的混合物。 分离亚细胞组分的
    2010-02-21
  • 微粒体(microsome)的分离

    细胞通过匀浆破碎时,细胞质膜碎成片段,这些膜片段的末端融合形成的直径小于100nm的小泡。来自不同细胞器(细胞核、线粒体、质膜、内质网等)的小泡有不同的特性,所以可以将这些小泡相互分离。由内膜系统衍生而来的小膜泡形成相似大小的膜泡异质性集合体,称微粒体(microsome)。分离
    2010-02-21
  • 溶酶体(lysosome)的分离

    溶酶体是由一层单位膜包围,内含多种酸性水解酶的泡状结构。溶酶体含有40多种水解酶,其中包括蛋白酶、核酸降解酶和糖苷酶等。其主要功能是对细胞内物质的消化作用。此外溶酶体与器官形成、激素分泌的调节以及某些疾病的发生密切相关。可采用如下方法分离获得。 1.制备蔗糖梯度溶液:取带有两个
    2010-02-21
  • 细胞总蛋白质的分离提取

    细胞器是一种动态的结构,如内质网、细胞核和高尔基体等,其蛋白质组成除了驻留蛋白质之外,还包括穿梭蛋白质和瞬间相互作用的蛋白质。对于这些组成成分的研究,即亚细胞蛋白质组研究将有助于对这些蛋白质做全面的挖掘,从而对细胞器的功能作深入的阐述。蛋白质提取与制备具体操作方法如下: 一、材
    2010-02-21
  • 叶绿体(chloroplast)的分离与荧光观察

    叶绿体足植物细胞所特有的能量转换细胞器,光合作用就是在叶绿体中进行的。由于具有这一重要功能,所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器,利用低速离心即可分离集中进行各种研究。 实验目的 一、通过植物细胞叶绿体的分离。了解细胞器
    2010-02-21
  • 细胞破碎(cell disruption)简介

    分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织,其细胞破碎的难易不一,使用的方法也不相同,如动物脏器的细胞膜较脆弱,容易破碎,植物和微生物由于具有较坚固的
    2010-02-23
  • [机械法]细胞破碎的方法、原理和优缺点

    1、高速组织捣碎机 捣碎机转速可达10,000r/min,具高速转动的锋利的刀片,宜用于动物内脏组织的破碎。 操作:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调速器先拨至最慢处,开动开关后,逐步加速至所需速度。 特点:由于旋转刀片的机械切力很大,制备一些较大分
    2010-02-23
  • 细胞破碎技术的基本概念及其基本方法

    生物分离是从生物材料、微生物的发酵液、生物反应液或动植物细胞的培养液中分离并纯化有关产品(如具有药理活性作用的蛋白质等)的过程,又称为下游加工过程。生物分离过程的主要特点:常无固定操作方法可循,生物材料组成非常复杂,分离操作步骤多,不易获得高收率,培养液(或发酵液)中所含目的物浓
    2010-02-23
  • 羊水细胞(amniotic fluid cell,AFC)染色体标本的制备

    一、原理 人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的生
    2010-02-23
  • 嗜酸性粒细胞(eosinophil ic granulocytes)的提纯

    关键词: 嗜酸性粒细胞; 密度梯度离心法; 免疫磁珠法; 流式细胞术 正常人血液中嗜酸性粒细胞占白细胞的0.5 %~5 % , 绝对值小于0.5 ×109/ L 。在患变态反应性疾病、寄生虫病 (特别是寄生在肠道外组织的寄生虫) 、皮肤病、血液病等疾病时嗜酸性粒细胞数升高, 尤
    2010-02-23