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1、如果靶细胞是帖壁细胞，在细胞因子作用适当时间后，用生理盐水洗***亡细胞，用0.25％胰蛋白酶液消化细胞。加适量生理盐水吹打，使细胞分散成单个细胞。直接在血细胞计数板上计数细胞。 2、如果靶细胞是悬浮细胞，则需要用染色剂区分死细胞和活细胞然后再计数。通常用台盼蓝染色细胞，活细

1、取96孔细胞培养板，每孔中加0.1ml含2×104 ～10×104 靶细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），在37℃ 5％CO2 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养2～3小时让细胞帖壁（如果是悬浮细胞可直接进行下一步） 2、用RPMI-1640培养液2～1

1、培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞（检测IL-2），或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞（检测 IL-3）到对数生长期。 2、取96孔细胞培养板，每孔加0.1ml含1×104 ～2×104 上述细胞之一的DMEM培养液（加10％小牛血清

1、按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。 2、吸去培养液，用PBS洗涤两次（如为悬浮细胞，应在吸去上清液前先离心）。 3、每孔加60μl NAG染液，在37℃ 5％ CO2 的饱和水汽CO2 培养箱中培养4小时。 4、每孔加90μl终止液，混匀后置酶联检

AlamarBlueTM 摄入法 1、按MTT检测法培养细胞和用不同稀释度的细胞因子处理细胞。 2、在培养结束前24小时加入Alamar Blue染料，96孔细胞培养板每孔20μl。 3、在培养结束后，直接在酶联检测仪上测定光吸收值。氧化型Alamar Blue的最大光吸收

1、按MTT法用细胞因子处理靶细胞适当时间，用PBS洗***亡细胞，洗两次。 2、向96孔细胞培养板各孔中加0.2ml新鲜配制的底物液（0.2mol/L 硼酸，1mmol/L MgCl2 ，1.2mmol/L甲伞基磷酸）。在37℃ 5％ CO2 的饱和水汽CO2 培养箱中培养3小

1、ATP反应液（Bio-Orbit）是粉末状混合物，含有荧光素、荧光素酶、0.5mmol醋酸镁、50mg BSA和0.1μmol无机焦磷酸。在4℃可以保存1个月。用前用10ml含2mmol/L EDTA的0.1mol/L pH7.75 Tris-醋酸缓冲液稀释。稀释液分装后可在

一、结晶紫检测法 1、在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104 ～104 WEHI-164细胞的培养液（含10％小牛血清的RPMI-1640培养液），37℃ 5％ CO2 的二氧化碳培养箱中培养2～3小时，让细胞帖壁。 2、用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TN

夏 飞 刘胜武 魏雅稚 肖 凌 【摘要】 目的 比较不同DNA提取方法对凋亡细胞内断裂DNA片段的提取效果及其影响因素。方法 采用试剂盒法、磷酸盐/柠檬酸缓冲液抽提法提取地塞米松诱导5h胸腺细胞内的DNA片段，后者分别经真空离心浓缩法和异丙醇及70％乙醇沉淀漂洗法提取DNA片段

Important notes： Morphological data so far are most reliable and convincing evidence for apoptosis， especially with electromicroscopy Morp