• 细胞计数及活力测定原理和操作步骤

    一、原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。 在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞 ,总细胞 中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞 一般也要检查活力,以
    2010-02-19
  • 细胞的分裂指数测定原理和操作步骤

    一、原理 体外培养细胞 生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。 分裂指数指细胞 群体中分裂细胞 所占的百分比,它是测定细胞 周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据。 二、仪器、
    2010-02-19
  • 淋巴细胞转化试验(MTT)

    (一)原理: 四甲基偶氯唑盐(MTT)可作为线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成紫兰色的甲臢,将结晶的甲臢溶解释放后,可根据所测的OD值反映活细胞的数量和活性,从而推知待测样品的水平。 (二)材料: MTT、电子天平、P
    2010-02-19
  • 小鼠造血干细胞/祖细胞免疫磁性分离操作步骤

    小鼠造血干细胞/祖细胞免疫磁性分离操作步骤: 1) 取小鼠骨髓用BD染色液制成约2×108单细胞悬液 2) 阻断:加入Ms Fc BlockTM置冰上15min,0.25mg/106细胞 3) 加入Lineage Panel中biotin-mAb, 每种2ml/ 106细胞
    2010-02-19
  • MTT相关技巧汇总

    (一)实验前应明确的问题 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行 MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培
    2010-02-19
  • 细胞凋亡(apoptosis)简介

    细胞程序性死亡是正常生理现象,多发生于胚胎发育和维持组织自身平衡。Kerr et al.最早发现有两种细胞死亡:坏死(Necrosis)和凋亡(Apoptosis)。Apoptosis,希腊文意思是树叶从树上“凋落”,这里是指凋亡,是细胞主动参与自身死亡的过程。凋亡程序有一些特殊
    2010-02-19
  • MTT实验经验心得

    MTT实验是检测细胞活力的实验方法,由于细胞活力与细胞数呈正相关,因此也常常用来检测细胞的增殖情况。MTT的原理:活细胞有琥珀酸脱氢酶,将 MTT还原成棕褐色沉淀。由于一般介绍已经很多,笔者将自己的心得按照实验流程与大家交流交流。 1、培养好细胞点板。 养细胞没啥好说的,如果
    2010-02-19
  • 细胞培养板的选择和使用问题与解决方法

    (一)培养板的清洗和消毒 培养板一般为一次性使用,尤其在接触了有毒、有害等物质后更应该处理后丢弃。但如果要反复使用则一定要进行正确的清洗和消毒,以保证细胞培养的效果。 问:只有紫外照射可以保证无菌吗?可不可以从清洗方面做点工作? 答:看你什么用途了,一般贴壁生长的细胞用重复
    2010-02-19
  • 四唑盐(MTT)比色法

    四唑盐(MTT)商品名为噻唑蓝 操作步骤 一、接种细胞 1、用胰蛋白酶消化汇合的单层细胞,将细胞收集到含血清的培养基中。   2、离心细胞悬液,使细胞沉积下来。用培养基重悬细胞,计数。   3、将细胞稀释至2.5×103-50×103 个/ml,每个微滴定板可容纳20m
    2010-02-19
  • 细胞爬片经验分享

    进实验室这么长时间了,每一天都好像过得很艰难,每一项实验的完成都很辛苦,其中的每一个细节都不能大意,不然做得一切都要前功尽弃。 实验室里没有人做细胞爬片,我连见都没见过,老板的实验却要求这个东西,只能自己摸索。查资料 搜信息,自己实践,终于做出了可以用来后期实验的细胞爬片。
    2010-02-19