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淋巴细胞转化试验(MTT)原理=材料和方法
(一)原理: 四甲基偶氯唑盐(MTT)可作为线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时,线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成紫兰色的甲臢,将结晶的甲臢溶解释放后,可根据所测的OD值反映活细胞的数量和活性,从而推知待测样品的水平。 (二)材料: MTT、电子天平、P
2010-03-18
IL-2生物学活性检测(MTT)原理材料和方法
(一)原理 白细胞介素-2(IL-2)是由活化的辅助性T细胞分泌的一种细胞增殖因子,具有促T细胞增殖和维持T细胞体外长期生长的作用。CTLL-2为IL-2依赖细胞株可用作IL-2生物学活性定量检测。本实验采用MTT分析法,通过测定CTLL-2细胞的增殖量,确定IL-2生物学活性
2010-03-18
细胞凋亡小体和梯状DNA的观察
一、实验目的 1 掌握诱导细胞凋亡和观察细胞凋亡小体的方法 2 掌握DNA电泳检测方法,证明凋亡细胞DNA Ladder的存在。 细胞死亡作为生物体的一种常见现象,一般可分为两种类型:细胞坏死(necrosis)和细胞程序性死亡(programmed cell
2010-03-20
MTT实验问题汇总
实验前应明确的问题 1. 选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间
2010-03-20
细胞凋亡(Apoptosis)实验
细胞凋亡(Apoptosis) 又称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是指细胞基因调控的一种自主性的自杀现象。即是在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自主结束生命的死亡方式。 凋亡一词最早是由年澳大利亚组织病理学家John Kerr通
2010-03-21
细胞凋亡的分子生物学检测方法
[实验原理] 细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ²+和Mg²+依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180~200bp核小体DN
2010-03-27
动物细胞融合(animal cell fusion)
一、实验目的 细胞融合是指两个或两个以上的细胞合并成为一个细胞的过程。在自然情况下,体内和体外培养的细胞均能发生自发融合现象。人工方法诱导细胞融合开始于50年,现在这项技术已成为研究细胞遗传、细胞免疫,肿瘤及细胞工程的重要手段。通过实验,了解细胞融合的原理,掌握细胞融合的基本方
2010-03-28
光学显微镜的使用、植物细胞有丝分裂的制片和观察
一、目的与要求 1、掌握光学显微镜的构造及使用方法。 2、掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术。 3、掌握有丝分裂过程中染色体的形态特征和动态变化。 二、实验原理 有丝分裂是植物细胞分裂的主要方式,细胞分裂过程中,核内染色体准确地复制,并有规律地、均匀地分配到两个子细胞中去
2010-03-28
淋巴细胞转化实验(Lymphocyte transformation test-LTT)
[实验原理] T淋巴细胞表面具有植物血凝素(PHA)和刀豆蛋白(ConA)等非特异性有丝分裂原受体,在体内或体外遇到有丝分裂原刺激后,可转化为淋巴母细胞,依其细胞转化程度可测定T细胞的应答功能,称为淋巴细胞转化试验。 淋巴母细胞的主要特点: (1)形态学改变:细胞体积明显增
2010-05-16
T 淋巴细胞转化试验(T Lymphocyte Transformation Test)
一、 基本原理 T 细胞在体外培养时,受到非特异性有丝分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出现细胞体积增大,代谢旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母细胞转化。淋巴细胞转化率的高低可以反映机体的细胞免疫水平,因此可作为测定机体免疫功能的指标之一。 淋巴细胞转化试验有形态计数法
2010-05-25
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