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RT-PCR原理、步骤与问题分析以及两步法RT-PCR
主要内容 RT-PCR原理 RT-PCR步骤 常见问题分析 两步法RT-PCR 一步法RT-PCR 两步法与一步法RT-PCR比较RT-PCR主要用途 分析基因的转录水平 获取目的基因 合成cDNA探针 逆转录酶的选择 AMV: 禽成髓细胞瘤病毒,逆转录酶
2010-03-13
Rt-PCR实验准备及与操作步骤
一、实验器具与材料: 1、移液枪:1ml、200μl、20μl、10μl、2μl 2、吸头:1ml、200μl、20μl 3、匀浆管:5ml 4、吸头台:放置1ml吸头的一个,放置20μl吸头的一个 5、EP 管:1.5ml、0.2ml、100μl 6、试剂瓶:2个6
2010-03-13
Gene-specific RT-PCR
Gene-specific RT-PCR This method was successful in our lab using prostate tissue and for our specific objectives. Investigators must be awa
2010-03-13
反转录PCR(RT-PCR, Reversed Transcript PCR)
1 原理 RT—PCR是一种将cDNA合成与PCR技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法,主要用于对表达信息进行检测或定量分析,还可以用来检测基因表达差异而不必构建cDNA文库克隆cDNA。 RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使
2010-03-13
ddRT-PCR(差示反转录PCR,又mRNA差别显示技术)
mRNA差别显示技术也称为差示反转录 PCR(Differential Display of reverse Transcriptional PCR)简称为ddRT-PCR。它是将 mRNA反转录技术与PCR技术二者相互结合发展起来的一种RNA指纹图谱技术。 目前已广泛应用于分
2010-03-13
RT-PCR (Reverse transcription PCR)
实验目的:学习RT-PCR的原理及其操作过程。 实验材料:水稻叶片的RNA。 实验原理:目前PCR技术只能扩增DNA模板,对 RNA模板不能直接扩增。mRNA 反转录生成的cDNA可作为PCR的模板进行扩增,这种在mRNA反转录后进行的PCR扩增称为RT-PCR。RT- PC
2010-03-13
RT-PCR protocol
RNA preparation 1. Grow cells to confluence in a single well of a 6-well plate. 2. Lyse the cells with 1 ml Trizol reagent. Pass the lysat
2010-03-13
Protocol for Real-Time RT-PCR
This protocol describes the detailed experimental procedure for real-time RT-PCR using SYBR Green I as mentioned in Xiaowei Wang and Brian S
2010-03-13
Real-time quantitative RT -PCR (Taqman)
Real-time quantitative RT -PCR (Taqman) This is performed as a 2-step reaction: 1. cDNA synthesis from DNase 1-treated total RNA 2. PCR
2010-03-14
RT-PCR原理与实验操作
一、知识背景: 1、基因表达:DNA RNA Protein 单拷贝基因表达存在逐步放大机制,如一个蚕丝心蛋白基因 104个丝心蛋白mRNA(每个mRNA存活4d,可以合成105个丝心蛋白) 共合成109个丝心蛋白 。因此单拷贝基因的mRNA表达水平对于其功能水平的调控是非常
2010-03-13
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