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蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
【实验原理】 蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中为带电的颗粒,在电场中能向正极或负极移动。当溶液pH值大于蛋白质等电点时,蛋白质带负电荷,在电场中向正极移动;反之则向负极移动,这种带电的颗粒在电场中泳动的现象称为电泳(electrophoresis)。不同的蛋白质由于等电点不同
2010-03-25
表达蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析
[实验原理] 细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电荷,在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)上,不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色,可及时观察电泳
2010-03-27
血清脂蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳
血清脂蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE;polyacrylamide gel electrophoresis)一 原理: 聚丙烯酰胺凝胶电泳,具有分子筛和电泳的双重作用,它的分辨力高,以此为电泳载体,可以将血清脂蛋白各组分分离。 血清中脂类物质均与血清载脂蛋白结合成水
2010-03-29
蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法
目的要求 学会SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法原理。 掌握用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量的操作技术。 实验原理: SDS是十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate)的简称,它是一种阴离子表面活性剂,加入到电泳系统中能使蛋白质的氢键、疏水键打
2010-04-05
聚丙烯酰胺等电聚焦电泳测蛋白质的等电点
实验原理 所有的氨基酸均为两性物质,即它们至少含有一個羧基(carboxyl)及一個氨基(α-amino)。這些可游离的基团随着pH变化可以三种形式存在,即正电荷(cation)、两性离子(zwitterion)及负电荷(anion)等三种,在酸性溶液中带正电荷,在碱性溶液中带
2010-04-05
蛋白质分子量的测定——葡聚糖凝胶过滤法
蛋白质分子量(protein molecular weight)的测定——葡聚糖凝胶过滤法实验原理 葡聚糖凝胶(Sephadex)过滤法测定蛋白质分子量的原理,主要是依据这种凝胶具有分子筛作用,一定型号的凝胶具有大体上一定大小的孔径。在一定的凝胶柱内,凝胶孔隙所占的体积称为内水
2010-04-05
SDS-PAGE检测表达蛋白实验原理和操作步骤
1.目的 学习SDS-PAGE的基本操作,学会用SDS-PAGE检测蛋白。 2.原理 蛋白质在加热变性以后与SDS结合,带上负电荷,在电场的作用下,向正极移动,结果按分子量大小排列在胶板上,含量多的蛋白带纹粗。 3.器材 旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,1.5m
2010-04-06
SDS-PAGE异常电泳现象及分析(SDS-PAGE “Hall of Shame”)
You may very well have prepared a nearly perfect gel, and would have a difficult time improving upon the product. If that is so, then by all
2010-04-08
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量
一、原理 用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离鉴定蛋白质(protein),主要依赖于电荷效应和分子筛效应。再与标准样品对照即可确定各区带的成分。要利用凝胶电泳测定某样品的蛋白质分子量就必须去掉其电荷效应,使样品的蛋白质分子的迁移率完全取决于分子量。如在电泳体系中加入一定浓度的十二烷基硫
2010-04-08
RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳
RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE; polyacrylamide gel electrophoresis)一、原理 核酸(ribonucleicacid,RNA)分子在一定pH值的缓冲液中带有电荷,将其放入电场中,可向与其所带电荷电性相反的电极移动。聚丙烯酰胺凝胶具有分子筛
2010-04-08
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