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(用RNeasy Plant Mini Kit) Purification of total RNA from plant cells and tissues and filamentous fungi (RNeasy Plant Mini Kit) Determining

[实验原理] RNA是一类极易降解的分子，要得到完整的RNA必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。本实验以小麦为材料，采用异硫氰酸胍—苯酚—氯仿抽提法或CTAB法提取总RNA。异硫氰酸胍是高浓度变性剂，可溶解蛋白质，破坏细胞结构，使蛋白质与核酸分离

1、塑料制品、玻璃和金属物品的处理 (a)塑料制品：尽可能使用无菌，一次性塑料制品。已标明RNase-Free 的塑料制品，如没有开封使用过，通常没有必要再次处理。对于国产塑料制品，原则上都必须处理方可使用。处理方法如下： (1)在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使DEP

RNase酶非常稳定，是导致RNA降解最主要的物质。它在一些极端的条件可以暂时失活，但限制因素去除后又迅速复性。用常规的高温高压蒸气灭菌方法和蛋白抑制剂不能使所有的RNase完全失活。为了获得高质量的真核细胞mRNA，必须使用RNA酶的抑制剂或采用下述的破碎细胞和灭活RNA酶同步

Materials 2 ml size Sarstedt screw cap tubes BIO-RAD Disposable Chromatography Column （BIO-RAD cat. #732-6008） Oligo dT cellulose RNase-

Tissue Harvest **Whatever the method of storage when harvesting, it is CRUCIAL that the tissue be stored immediately following sacrifice a

一、目的 　　了解核酸的组分，并掌握鉴定核酸组分的方法。 二、原理 　　酵母核酸中RNA含量较多。RNA可溶于碱性溶液，在 碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀， 由此即得到RNA的粗制品。 　　核糖核酸含有核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸各组分。加硫酸煮沸可使其

（1）取3 g样品，加入10% 样品重的多聚聚乙烯吡咯烷酮（PVPP），用液氮研磨成细粉状，将细粉分为每份约3 g，并贮藏于-80℃下。 （2）在50 ml falcon管中加入20 ml提取缓冲液。提取液的组成为0.2 mol/L 脱水四硼酸钠（sodium tetribor

哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解，以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。 一、实验材料： Trizol试剂（Invitrogen公司） 研钵，匀浆器，镊子，铝箔都高温灭菌即可； 二、具体

实验目的： 使学生掌握采用Trizol抽提法从动物新鲜组织或细胞制备总RNA的实验技术，以及用紫外分光光度法检测RNA的纯度及定量、用琼脂糖电泳法检测RNA的完整性及质量。 实验原理： Trizol是一种新型的总RNA即用型制备试剂，适用于从各种组织或细胞中快速分离总RNA