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下面的方法是对Cohen等于1972年发表的方法更为便捷的修改。这一方法可以用于批量制备感受态细胞，其转化效率可达到5×106-2×107个转化克隆/ug超螺旋质粒DNA。这个转化效率对于方便地进行质粒中克隆已经足够高了。用此方法制备的感受态细胞可以在-70℃冻存。但随着冻存期的

刘静华，包英华，陈燕飞 (韶关学院英东生物工程学院，广东韶关512oo5) 摘要：针对实验材料E．coli DH5a，对该茵株在不同生长时期的转化效率进行测定，确立了一个能制备高转化率感受态细胞的实验方案．结果表明：在细茵的生长繁殖过程中，其转化率有很大变化；得到了E．coi

1.概 述 在自然条件下,很多质粒都可通过细菌接合作用转移到新的宿主内,但在人工构建的质粒载体中,一般缺乏此种转移所必需的mob 基因,因此不能自行完成从一个细胞到另一个细胞的接合转移。如需将质粒载体转移进受体细菌，需诱导受体细菌产生一种短暂的感受态以摄取外源DNA。 转化(

（1）含IL-2质粒DNA探针的提取 取含IL-2质粒DNA的单个菌落置两个25ml LB培养基（含100μg/ml Amp） ↓37℃ 220r/min 振摇过液(约16h ) 取10ml菌液加200ml LB培养液(含100μg/ml Amp) ↓37℃ 150r/

1．单一固定液的性质和用途 （1）乙醇（C2H5OH）（ethylalcohol）：又名酒精，可沉淀白蛋白、球蛋白、核蛋白，后者易溶于水，所以经酒精固定的标本对细胞核染色不良。酒精可溶解脂肪、类脂体，所以不能用酒精固定脂肪。酒精可沉淀肝糖，但仍可溶解于水，因此肝糖经酒精固定后不

(Inoue, Gene 96 (90) 23-28) 1) Pick a few colonies from plates and inoculate into 100 ml of SOB medium in 500 ml flask. Grow at 18 °C with

随着DNA合成技术的发展，特别是自动化合成技术的引入，人们能简便、快速、高效地合成其感兴趣的DNA片段。目前，DNA合成技术已成为分子生物学研究必不可少的手段，并且已在基因工程、临床诊断和治疗、法医学等各个领域中日益发挥重要的作用。 1. DNA合成在基因工程和分子生物学研究中

（一）、仪器设备 医用微波炉； 水浴锅。 易生物仪器库：http://www.ebioe.com/yp/product-list-42.html （二）、试剂 0.2mol/L HCl：HCl 8.2ml，H20 定容0.5L。 0.1mol/L三乙醇胺(pH8.0)：

1、如何看待提取得率？ 影响回收率的因素很多，如DNA片段大小、点样量、凝胶种类、电泳缓冲液的缓冲能力、切胶操作、紫外灯照射强度和时间、溶胶是否彻底等等，所以不能单凭1-2次的实验来判断其质量好坏，最好是多做几次实验或用几种不同品牌的产品做平行对照实验，结果相对真实。 2、用

肽核酸(peptide nucleic acids，PNA)是20世纪90年代初发现的新型DNA/RNA同类物，是一类人工合成的以电中性的肽链酰胺2-氨乙基甘氨酸组成、多聚酰胺键取代 DNA中的戊糖磷酸二酯键骨架而形成的类似核苷酸的物质。像传统的DNA序列那样，PNA寡聚体的氨基