• RAPD技术及其在假丝酵母菌研究中的应用

    随着医学科学的发展及人们对深部真菌感染的重视,越来越多的新技术用于临床真菌的检测和鉴定,随机扩增DNA 多态性(RAPD)是在PCR基础上发展起来的一种新的基因分型方法。本文综述了假丝酵母菌RAPD分析技术应用的研究进展及前景。 近年来,随着肿瘤、自身免疫病、器官移植、糖尿病、
    2010-01-22
  • BAC提取方法步骤

    BAC提取前准备(前两天 ) 配制含25 mg/l Kan的LB培养基选择平板,在超净工作台上用接种环从购买的BAC划线接种至选择平板,于37℃培养箱培养过夜,供选择单。 BAC提取前准备(前一天) 1、在超净工作台上,用50 µg/ml Kan和液体LB培养基配制成25
    2010-01-22
  • 如何确定转基因拷贝数(Southern Blot法和荧光定量PCR方法)

    鉴定转基因植物的第一步就是要确定被转基因已经稳定的整合到了染色体上。第二步任务就是评估有多少个转基因拷贝,以及每个转基因的表达水平如何。一般经过上游表达载体的设计构建以及下游转化体系的建立、转化品系的筛选鉴定等一系列步骤后,即获得 T 0 代转基因植物。在转化过程中,外源 DNA
    2010-01-22
  • 流感病毒实验室检查技术(标本采集处理、病毒分离与与鉴定)

    一、标本的采集与处理 (一)标本的采集 1、病毒分离标本的采集 病毒分离成功与否很大程度上取决于采集标本的质量,及其保存、运输等环节。多数标本取自患者上呼吸道鼻咽腔,其次为气管和支气管分泌物,有时也采用肺活检材料等。 标本采集后应立即放入适当的采样液中低温保存,常用的采样
    2010-01-24
  • 甲型H1N1流感病毒实验室检测技术方案(试行)

    一、标本的采集种类和要求 1、推荐采集的呼吸道标本种类 疾病发病后应尽快采集如下标本:鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液。气管插管的病人也应收集气管吸取物。标本应置于无菌病毒采样液,并立即用冰块或冰排保存或置于4 ℃ (冰箱),并马上送至实验室。(临床样品采集人员及实验室
    2010-01-24
  • 单细胞基因表达分析(Single Cell Gene Expression Profiling)

    Single Cell Gene Expression Profiling: Multiplexed Expression Fluorescence in situ Hybridization (FISH) Application to the Analysis of Cult
    2010-01-24
  • 聚焦转染:转染实验要注意的一些问题

    转染——让克隆的核酸进入真核细胞中,已经成为研究和控制真核细胞基因表达的重要手段。比如表达纯化特定的蛋白;鉴定一个基因的生物学特性;突变分析;研究基因表达对细胞生长的影响,研究基因表达的调控机制等等,等等。如今广义的转染不单包括了DNA、RNA,还有蛋白质等生物大分子。生物通在前
    2010-01-25
  • 细胞转染技术简介

    转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例;化学介导方法很多,如经典的磷酸钙共沉淀法、脂
    2010-01-25
  • 耐药质粒DNA转化实验

      本实验学习将质粒DNA分子转入大肠杆菌的方法及如何筛选带有质粒DNA的细胞克隆,即转化子。      【原理】   受体菌Ecoli RRI 在低温条件下经Ca++ 处理,可改变细胞膜的通透性,利于受体菌对DNA的摄取,这种经Ca++ 处理的细菌称感受态菌。pBR322
    2010-01-25
  • 质粒DNA的转化实验原理、仪器试剂和操作步骤

    【原理】 转化是将外源 DNA 分子导入到受体细胞,使之获得新的遗传特性的一种方法。转化所用的受体细胞一般是限制 - 修饰系统缺陷变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶( R- , M- )。将对数生长期的细菌(受体细胞)经理化方法处理后,细胞膜、的通透性发生暂时性改变,成为能允
    2010-01-25