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【基本原理】 聚合酶链反应（polymerase chain reaction， PCR）是体外酶促合成特异 DNA片段的一种技术。利用PCR技术可在数小时之内大量扩增目的基因或DNA片段，从而免除基因重组和分子克隆等一系列繁琐操作。由于这种方法操作简单、实用性强、灵敏度高并可

在基因表达研究中，研究者比较注意选择合适的表达载体和宿主系统，而往往忽视基因本身是否与载体和宿主系统为最佳匹配这样一个实质性问题。基因的最佳化表达可以通过对基因的重新设计和合成来实现，如消除稀有密码子而利用最佳化密码子，二级结构最小化，调整GC含量等。以下就密码子最佳化、翻译终止

【原理】 PCR 即聚合链式反应，它是近年来发展起来的一种体外扩增特异性 DNA 扩增技术。 PCR 技术实际上是在模板 DNA 、引物和４种脱氧核糖核苷酸 (dNTP) 存在的条件下依赖于 DNA 聚合酶的酶促合成反应。 PCR 技术的特异性取决于引物和模板 DNA 结合的特

[实验原理] 原位杂交组织(或细胞)化学 (In situ Hybridization Histochemistry, ISHH) 简称原位杂交(In Situ Hybridization)，属于固相分子杂交的范畴，它是用标记的DNA或RNA为探针，在原位检测组织细胞内特定核酸

王友如 (湖北师范学院生物系，湖北黄石435002) 摘要：对于E coli茵株用8种不同浓度的CaC1 制备感受态细胞，然后转化各浓度的感受态细胞。实验结果表明，不同浓度CaCt2溶液处理所得到的感受态细胞，其转化效率有很大的不同。随着CaCI 浓度增高，转化效率也随之提高

常用的基因转染技术是将外源基因导入靶细胞需要一定的载体和导入方法，基因转技术则是将纯化的含有靶基因的质粒DNA送入细胞内，并在细胞内表达。 转染方法有多种，根据不同的细胞，贴壁或悬浮细所可选用不同的方法，其目的是要达到设置转染效率，影响转染产率的因素有多种，包括转染方法、操作技术

原位杂交组织(或细胞)化学 (In situ Hybridization Histochemistry，ISHH) 简称原位杂交(In Situ Hybridization)，属于固相分子杂交的范畴，它是用标记的DNA或RNA为探针，在原位检测组织细胞内特定核酸序列的方法。根据所

一、质粒制备 1质粒的转化和扩增 1.1制备XL1-Blue感受态细菌 1．取 400uLXL1-Blue菌种加入到含200mlLB培养基的锥形瓶中，37℃、100rpm培养4h，离心，倒置，以冰冷的 0.1mol／LCaCl_2重悬细菌，冰浴30min，离心，弃上清，倒置

随着DNA合成技术的发展，特别是自动化合成技术的引入，人们能简便、快速、高效地合成其感兴趣的DNA片段。目前，DNA合成技术已成为分子生物学研究必不可少的手段，并且已在基因工程、临床诊断和治疗、法医学等各个领域中日益发挥重要的作用。 1. DNA合成在基因工程和分子生物学研究中

（一）、仪器设备 医用微波炉； 水浴锅。 易生物仪器库：http://www.ebioe.com/yp/product-list-42.html 易生物试剂库：http://www.ebioe.com/yp/product-list-43.html （二）、试剂 0.2