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原位杂交与荧光原位杂交
一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学
2010-03-08
Southern Blotting(Fred Hutchinson Cancer Research Center)
DNA Transfer 1. Depurination of DNA fragments: Wash gel in 0.25 M HCl 5' (small gels), 7' (large gels) 2. Denaturation: Wash gel in (0.5 M
2010-03-08
Southern Blot using Neutral Transfer
-Elaine Pinheiro and Aurora Burds Connor MIT, Jan2006 This protocol works very well with Hybond-XL membrane from GE Healthcare (formerly A
2010-03-08
Southern Hybridization Experiment Kit
This kit contains materials for six groups to perform Southern transfer and hybridization analysis using the included lambda DNA samples and
2010-03-08
Southern Blotting
Southern Blotting: Detection via Chemiluminescence (BM's Genius System) Modified to include the use of CSPD for chemiluminescent detection
2010-03-09
Southern转膜方法
将凝胶中的DNA进行碱变性并将pH值恢复至中性后,即可将凝胶中的DNA片段转移到固相支持物上。用于转膜的固相支持物有多种,包括硝酸纤维素滤膜(NCM)、尼龙膜、化学活性膜和滤纸等, Southern转膜时可根据需要选择不同的固相支持物用于杂交。常用的Southern转膜方法有以
2010-03-15
Southern Blot实验原理及方法
实验原理: Southern Blot是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射
2010-03-20
Southern blot实验方法和操作步骤
第一天 (restriction enzyme digestion) 1.取待測的genomic DNA,用二次水稀釋10倍 (30μl的DNA 加270μlddH2O→ 300μl) 2.換算genomic DNA濃度(OD260),再換算取10μg所需的體積。 3.取
2010-03-20
采用优化红球菌的地高辛标记探针的DNA印迹方案
xian o’brien 大公无私地为此测试,优化和作图 黑体字表示的试剂列在方案末,以斜体字标明Roche DIG标记和测试工具箱 采用地高辛高效标记混合物(ROCHE) 标记DNA探针 y 将10 ng~3μg的DNA探针(基因组、质粒或基因片段)用蒸馏水稀释至16μl
2010-03-20
Southern 杂交技术
Southern技术是指以Southern名字命名的DNA转移杂交技术。它可用于基因组特定DNA序列的定位,可以测定相关片段的同源性、可以从c库、基因组文库中筛选完整基因等。用一种或多种限制性内切酶对基因组DNA加以切割,通过琼脂糖凝胶电泳分离酶切片段,随后,使DNA在原位变性,
2010-04-15
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