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在单克隆抗体制备中，首先进行的就是抗原的设计与合成，这是制备单抗成功与否的关键。因为产生抗体的特异性与亲合性是与抗原密切相关的，合成的抗原如果可以将所需要的抗原决定簇充分暴露出来，那么机体更容易识别抗原决定簇，从而免疫的动物所产生的抗体自然会在特异性和亲合力上最大程度的与抗原决定

Order 6 six week old Balb/C mice and let the ARC know they are coming.Have your antigen ready for when they arrive.Once they get there earma

本要点适用于供治疗的体内诊断用的利用杂交瘤技术制备的单克隆、抗体，适用于在人体内应用的利用重复DNA技术制备的基因工程抗体 一、杂交瘤技术制备的单克隆抗体 （一）杂交瘤细胞 1、亲本细胞 （1）骨髓瘤细胞 SP2/0或其他适宜的骨髓瘤细胞系。应为不合成或不分泌免疫球蛋白

一、反应体系 1、抗体 第一抗体，常用的或自备的抗体 （1）如果第一抗体或自备的抗体能够进行荧光标记（如FITC，PE或其他），请参考直接染色步骤 （2）如果第一抗体不能进行荧光标记，则参考间接染色步骤 2、第二抗体 经荧光标记过的多克隆抗体 3、缓冲体系 PBS

一、概念　 佐剂（adjuvant）是指能够增强免疫应答或改变免疫应答类型的物质，应用时可与抗原同时或预先注射于机体。佐剂本身可以有免疫原性，也可以没有免疫原性。 应用佐剂的目的是为了提高抗原对机体的免疫原性，从而提高抗体的效价。颗粒性抗原（如细菌、细胞）因具有较强的免疫原性

一、动物的选择 目前应用最广的是小白鼠和大白鼠，尤以小白鼠为好。就品系而言以Balb/c小白鼠应用最广，因为所有的小白鼠骨髓瘤系均从Balb/c小白鼠系诱导出来。Balb/c系小白鼠必须用纯系的，雌雄均可，以8~12周龄为宜。大白鼠也可，能产生较多量的单抗体。现在已经在小鼠杂交

[器材和试剂] ● 链霉亲和素磁珠（DynabeadsM280,Dynal） ● 磁性1.5ml试管架（Dynal） ● 磷酸盐缓冲液（PBS） ● 2%脱脂奶粉PBS（2%MPBS） ● 生物素化试剂盒 ● 含0.1为Tween-20的PBS（PBS/Tween）

[器材和试剂] ● PCR试剂和设备 ● 含有起始scFV基因的载体pHENl单链模板DNA（50ng/ul） ● Geneclean试剂盒 ● Wlzard PCR纯化试剂盒 ● scFvJHL2XhoFOR引物：5'-GAG TCA TTC TCG TCT CGA

[器材和试剂] ● PCR试剂和设备 ● cFv基因文库单链模板DNA,制备自pHENl中的天然scFv文库（10ng/u1） ● Gelleclean试剂盒（Qbiogene） ● Wtzard PCR纯化试剂盒（ProlneSa） ● RJHl/2Xho引物： 5'

[器材和试剂] ● PCR试剂和设备 ● 含有起始scFv的pHENl质粒或单链DNA（ssDNA） ● Wlzard PCR纯化试剂盒（PrOli]egs.） ● PdSEQl引物 ● 定制BACK引物。本实验方案中，该引物是scFvVlBACK引物：5'-AGC G