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G418筛选实验相关问题
问:G418筛选预实验用未转染的细胞做,选10-14天内细胞死亡的最小浓度,然后将更高一级别的浓度应用于转染的细胞,是这样吗? 答:G418是一种细胞毒性药物(氨基糖苷类抗生素),依不同浓度,对细胞有一定的抑制或杀伤作用,而拟转染的质粒上带有G418的药代酶,能降解G418,从
2010-02-22
茜素红染液的配方法
茜素红S 中文名称: 茜素红S英文名称:alizarin red S; sodium alizarin sulfonate CAS: 130-22-3分子式: C14H7NaO7•;H2O分子量: 360.28中文别名: 9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-
2010-02-22
如何细胞运输的方法
装运细胞的主要方法如下: 一、冷冻储存运输 这是一种利用特殊容器内盛液氮或干冰的运输方法。保存效果较好,但缺点是比较麻烦,不宜长时间运输,多需空运,代价较大。 1、干冰运输:较为常用,也很保险,成本不算高,但航空禁运,如果本人携带,汽车、火车均可,20h有5kg干冰足矣,但
2010-02-23
培养基(culture medium)的制备步骤和灭菌方法
一、实验目的 1.了解并掌握培养基的配制、分装方法; 2.掌握各种实验室灭菌方法及技术。 二、实验原理 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差
2010-02-23
血管内皮细胞(vascular endothelial cell;VEC)的生物学功能
摘要 本文概述了近年来国内外对血管内皮细胞生物学功能的最新认识,指出血管内皮细胞除作为血液和组织间物质转运的屏障外,最主要的功能是使循环血液保持流动状态,防止血栓形成,文章同时强调了血管内皮细胞在生物学、医学研究领域中所起的重要作用。 关键词 血管内皮细胞 选择通透性 抗凝
2010-02-28
明胶酶谱分析法
一.用品 1.细胞培养或者提取组织 2.试剂的配制 (1)配制10%SDS聚丙烯酰胺凝胶(含1.0mg/ml 明胶) A.分离胶的配制(注:根据你所用的电泳仪胶的大下确定配制胶的量) 10% SDS聚丙烯酰胺凝胶 5ml(包括) ddH2o 1.5ml 30% 储备
2010-03-02
pcDNA3.1-GFP转染细胞实验
【原理】 外源基因进入细胞主要有三种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法,实际上其基本原理都是利用不同的方法在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入,但是由于前两者的效率低且伤害较大,所以现在除了对于一些特殊细胞系,一般的转染方法都利用脂质体。 利用脂质体转染和其他方法一样,
2010-03-07
细胞死亡的分类
吕冰峰 北京大学基础医学院免疫学系分子免疫实验室 北京大学人类疾病基因研究中心 摘要:细胞死亡是多细胞生物生命过程中重要的生理或病理现象。细胞死亡有很多种,基于不同的分类标准,其分类结果也不一样。细胞死亡有程序性和非程序性之分,后者即坏死。程序性细胞死亡按其发生机制不同可以
2010-03-19
细胞数目技术测定的原理和步骤
原理 取经一定稀释的细胞或小孢子原生质体悬液,把它注入血球记数板的记数室中,然后在显微镜下逐格计数。因为记数板是一块特制的载波片。其上由四条平行槽 构成的三个平行台,中间的平台较宽,此平台的中间又被一短槽隔成两半,每边平台上面各刻有一个方格网,每个方格网共分九大格,中央大格即为
2010-03-20
RPMI 1640细胞培养液的配制
1)配制培养基最好使用新制备的三蒸水。一般在试验前当天或前一天制备为好。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配制。 2) 制备培养基的器皿清洗要绝对干净,烤干后备用(滤器、滤膜、量筒、移液管及盛放培养基的小瓶等存放和转移培养基液体的器具都应进行灭菌)。 3)溶解培养基:将干粉
2010-03-20
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