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离子色谱(ion chromatography,IC)分离方式和检测方式的选择
分析者对待测离子应有一些一般信息,首先应了解待测化合物的分子结构和性质以及样品的基体情况,如无机还是有机离子,离子的电荷数,是酸还是碱,亲水还是疏水,是否为表面活性化合物等。待测离子的疏水性和水合能是决定选用何种分离方式的主要因素。水合能高和疏水性弱的离子,如Cl-或K+,最好用
2010-04-07
氨基酸单向纸层析实验原理和步骤
一、实验目的: 1、通过氨基酸的分离,学习并掌握纸层析 的原理和操作技术; 2、掌握分配层析法; 3、掌握影响分配系数的因素。 层析分离技术是利用被分离的混合物中各组分物理化学的性质(分子的形状和大小、分子极性、吸附力、分子亲和力、分配系数等)的不同,使各组分以不同程度
2010-04-07
层析法常用数据表及性质
一) 离子交换纤维素 目前常用的离子交换纤维素列于下表 DEAE- 纤维素 形状 长度 (微米) 交换当量 (毫克当量/克) 蛋白吸附容量 (毫克/克) 床体积(毫升/克) 胰岛素(pH8.5) 牛血清清蛋白(pH8.5) pH6.0 p
2010-04-07
葡聚糖凝胶层析脱盐(Desalination)
一. 目的 学习凝胶层析的工作原理和操作方法 掌握利用葡聚糖凝胶层析进行蛋白质脱盐的技术 二. 原理 凝胶层析又称凝胶过滤或排阻层析。凝胶过滤的主要装置是填充有层析介质的层析柱。 1. 层析介质的特点 (1)遇水为不溶解的固相; (2)是化学惰性物质; (3)离子基
2010-04-07
层析技术(Chromatography Techniques)
层析技术是近代生物化学实验中常用的分析方法。任何层析过程都是在两个相中进行的。一是固定于支持物上的固定相,另一是流经固定相的流动相,由于样品中各组分理化性质(如溶解度、吸附能力、分子形状、分子所带电荷的性质和数量、分子表面的特殊基团、分子量等)不同,表现出对固定相和流动相的亲和力
2010-04-07
层析技术:生物化学实验常用技术
层析技术是近代生物化学最常用的分离技术之一。它是利用混合物中各组分的理化性质(吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等)的差异,在物质经过两相中,不断地进行交换、分配等过程。任何层析都具有两个相,即固定相和流动相。固定相固定不动,流动相对固定相作单相的相对运动,从
2010-04-07
亲和层析法(affinity chromatography)纯化多克隆抗体
【实验原理】 如图所示,亲和层析的高度选择性使得从某一初始材料中纯化,富集某一含量较低的目的蛋白成为可能,因此亲和层析是蛋白质分离纯化过程中最有效的方法之一。另外,如果配基与蛋白质的亲和能力很强,也可同时进行样品的浓缩。 虽然多数情况下不需要将抗体与其他血清蛋白分开,但如果一
2010-04-07
离子交换柱层析(ion-exchange chromatography)分离核苷酸
一、目的: 学习离子交换柱层析法分离核苷酸的原理及方法。 二、原理: 离子交换作用一般指在固相和液相之间发生的可逆的离子交换反应,它可用于分离各种可解离的物质。通常离子交换剂是在一种高分子的不溶性母体上引入若干活性基团。这样人工会成的离子交换剂具有各种各样的性能。作为不溶性
2010-04-07
蛋白质分子量测定:凝胶过滤层析法
一、目的: (1)初步掌握利用凝胶层析法测定蛋白质分子量的原理。 (2)学习用标准蛋白质混合液制作Ve,Kav对1gMr的“选择曲线”以及测定未知蛋白质样品分子量的方法。 二、原理: 凝胶层析法(即凝胶过滤法,gel filtration)是利用凝胶把分子大小不同的物质分
2010-04-07
离子交换树脂层析分离混合氨基酸
【实验目的】 1. 了解离子交换树脂层析的工作原理及操作技术。 2. 学会用离子交换树脂层析法分离混合氨基酸。 【实验原理】 离子交换树脂是一种合成的高聚物,不溶于水,能吸水膨胀。高聚物分子由能电离的性基团及非极性的树脂组成。极性基团上的离子能与溶液中的离子起交换作用,而
2010-04-07
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