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凝胶层析法(gel chromatography)测定蛋白质相对分子质量
实验目的 掌握凝胶层析的基本原理。 学习利用凝胶层析法测定蛋白质相对分子质量的实验技能。 实验原理 凝胶层析法也称分子筛层析法,是利用具有一定孔径大小的多孔凝胶作固定相的层析技术。当混合物随流动相经过凝胶层析柱时,其中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。该法设备简单、操
2010-04-01
不同分子量蛋白质的分离——凝胶管柱层析法
实验原理 凝胶层析又称凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中,只留在凝胶颗粒之间的流动相中,因此以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则能自由出入凝胶颗粒中,并很快在流动相和
2010-04-05
离子交换层析法(ion exchange chromatography)分离氨基酸
实验原理 离子交换层析法主要是根据物质的解离性质的差异而选用不同的离子交换剂进行分离的方法。各种氨基酸分子的结构不同,在同一pH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依据亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效果。 试剂和器材 一、试剂与材料 苯乙烯磺酸钠型树脂
2010-04-05
核酸碱基薄层层析双波色谱扫描分析
贾成禹窦永泽 (中国科学院成都生物研究所) 核酸组成成分及衍生物的分析除常用的电泳、纸层析和薄层层析洗脱比色法外,近年来又出现了双波长色谱扫描法和高压液相层析法[2,51。但已报道的双波长色谱扫描法测定的碱基种类不多,在测定DNA (G + C)克分子外方面,尚未见报道。我们
2010-04-07
更年安片薄层色谱鉴别原理和操作步骤
一.目的要求 1掌握薄层荧光法的原理及操作。 2掌握薄层色谱法在中药制剂鉴别中的应用。 二.基本原理 更年安片由地黄、泽泻、五味子、制何首乌等药味组成,可利用薄层色谱法对五味子和制何首乌进行鉴别。五味子中主要有效成分为木脂素类,五味子甲素为其主要有效成分之一,可吸收UV光
2010-04-07
层析方法之高效液相色谱(HPLC,High Performance Liquid Chromatography)
高效液相色谱(HPLC:High Performance Liquid Chromatography)是化学、生物化学与分子生物学、医药学、农业、环保、商检、药检、法检等学科领域与专业最为重要的分离分析技术,是分析化学家、生物化学家等用以解决他们面临的各种实际分离分析课题必不可缺
2010-04-07
气相色谱层析(gas chromatography)
基本原理 混合样品的气流通过固定相时,根据各组分对固定相的吸附强弱不同使不同成分得到分离。气相色谱仪的基本流程,如图2-26。 气相色谱仪的基本部件 (1)载气 常用的载气主要有氮、氩、氢和二氧化碳等。这些气体一般都由高压气瓶供给 (2)进样器 气相色谱仪可以用于分离固相
2010-04-07
亲和层析(Affinity Chromatography)
亲和层析(Affinity Chromatography)是利用生物分子间专一的亲和力而进行分离的一种层析技术。人们很早就认识到蛋白质、酶等生物大分子物质能和某些相对应的分子专一而可逆的结合,可以用于对生物分子的分离纯化。但由于技术上的限制,主要是没有合适的固定配体的方法,所以在
2010-04-07
层析方法:纸层析(paper chrmatography)
纸层析是分配层析法的一种,其以滤纸为惰性载体,展层溶剂大多是由水饱和的有机溶剂组成。 滤纸纤维的—OH 基的亲水基团可吸附有机溶剂中的水作固定相,有机溶剂作流动相,当流动相沿滤纸自下向上展开,称为上行层析;反之,流动相自上向下移动,为下行层析。 纸层析法主要依据混合组分对两相
2010-04-07
蛋白质DNS分析法DNS—Cl(膜层析技术)
一、实验目的 1.掌握DNS 分析法测定氨基酸的原理与方法。 2.进一步熟悉薄膜层析的操作。 二、实验原理 荧光试剂二甲氨基萘磺酰氯即DNS—Cl(Dansyl—Cl),能与所有氨基酸的氨基结合,生成荧光物质DNS—氨基酸。DNS—Cl 也能与蛋白质或多肽的游离氨基结合,
2010-04-07
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