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After an aliquot of the PCR mixture is analyzed on an agarose gel, the remainder of the reaction is concentrated by ethanol precipitation, r

From: Molecular Biology: Current Innovations and Future Trends. Eds. A.M. Griffin and H.G.Griffin. ISBN 1-898486-01-8 1995 Horizon Scientif

Preparation of G+A Marker 　　Author: Long-Cheng Li 　　Source: Protocol Online 　　Abstract: Simplified method for preparing G+A ladder run al

一、聚合酶链反应的历史回顾 1、核酸体外扩增最早的设想 由Khorana及其同事于1971年提出：“经过DNA变 性，与合适引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重视该过程便可克隆tRNA基 因”。但由于当时很难进行测序和合成寡核苷酸引物，且当时(1970年)Smith等发

Possible Causes: Components 可能原因之一——反应组分 · Primer concentration is too high. · Primer degeneracy is too high. · Nested primers are requir

第一节 概 述 PCR (Polymerase Chain Reaction，聚合酶链反应)是一种选择性体外扩增DNA 或RNA的方法。它包括三个基本步骤: (1) 变性(Denature):目的双链DNA 片段在94℃下解链; (2) 退火(Anneal):两种寡核苷酸引物在

1.PCR反应的最适条件 1．1 TaqDNA聚合酶 在早期进行的PCR反应中，使用的是大肠杆菌DNA聚合酶1的大片段，即Klenow片段。也曾有人用噬菌体T4 DNA聚合酶。这两种酶的共同弱点是对热不稳定性，DNA合成反应只能在37℃进行。PCR时每一循环的解链温度都在90

高等生物遗传图谱的构建依赖于选择性杂交后代的分析或者通过家系分析法来计 算连锁关系。对人类而言仅后者是可行的。使用长度多态性限制片段（RFLPS）在构 建人连锁图谱方面已取得长足的进步。为了对带有与已知表现型相关的RFLP标记的基 因进行定位，首先得建立间隔约10CM的遗传标记束

1、导论 多聚酶链式反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）是美国Perkin-Elmer/Cetus公司人类遗传研究室Mullis K. B.等人于1985年发明的一种快速体外DNA片段扩增技术，是八十年代分子生物学资源领域的一项革命性突破，被誉为

一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性： 通常所用的PCR方法都在两个方面有局限，即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcus furiosus)DNA聚合酶，具有完整的3'外切酶校读活性（3'-editing-exonuclease），可以将每个循环中