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光镜下细胞大小的测量与计数
一、实验目的 1.学会观察某些细胞形态,掌握显微镜使用方法。 2.掌握测量和计算细胞大小的方法。 3.掌握台尺,目尺的使用方法,知道细胞度量单位。 4.掌握血球计数板的使用方法 二、实验原理 (一)显微测微尺 显微测微尺分物镜测微尺和目镜测微尺,目镜测微尺为一块可以
2010-04-06
植物细胞骨架(cytoskeleton)的光学显微镜观察
一、实验目的 了解细胞骨架的结构特征及其制备技术。 二、实验原理 细胞骨架(cytoskeleton)是由蛋白质丝组成的复杂网状结构,根据其组成成分和形态结构可分为微管、微丝和中间纤维。它们对细胞形态的维持,细胞的生长、运动、分裂、分化,物质运输,能量转换,信息传递,基因表
2010-04-06
姊妹染色单体(sister chromatid)色差方法
在DNA复制过程中,核苷的类似物5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridine简称BrdUrd)或5-碘尿嘧啶核苷(5-Iodo-2′-deoxyuridine简称IdUrd)可以代替核苷酸掺入新合成的DNA链,并占有胸腺嘧啶(Thymidine,T)的位置。哺乳类
2010-04-22
RNA印迹(Northern Blot)
【实验原理】 将RNA变性及电泳分离后,转移到固相支持物上,用于与DNA探针杂交以鉴定其中特定 RNA分子的大小与含量。基本原理与Southern印迹相同,但RNA变性方法与DNA不同,不能用碱变性,因为碱会导致RNA的水解。 Northern印迹主要用于组织细胞靶基因表达水
2010-03-25
蛋白质印迹与探测(Western Blot)实验原理、方法与步骤
【实验原理】 Western Blot(蛋白质印迹或免疫印迹)技术,以蛋白质为检测对象,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。实验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)将样品蛋白质分离,再转移到固相载体(PVDF尼龙膜或NC膜)上;固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且保持电泳分离的
2010-03-25
Northern Blotting反应方法步骤
Northern杂合反应的步骤主要包括: (1) 加入核酸探针,使与固定于尼龙膜上的特定RNA 进行杂合反应; (2) 待杂合反应结束后以含盐缓冲液与SDS 洗掉非专一性结合于尼龙膜上的核酸探针。 进行反应时应注意下列几个问题: a. 实验操作过程仍应尽可能避免RNase
2010-04-16
Northern Blotting转印实验(毛细管转移法)
要进行Northern杂合反应前,必须先将RNA自洋菜胶体转移至硝化纤维纸(nitrocellulose membrane) 或尼龙膜 (nylon membrane) 上,这一个过程称为转印 (blotting)。 一般常用的方法包括毛细管转移法 (capillary tran
2010-04-16
Northern blot实验操作步骤
一、经乙二醛和二甲基亚砜变性处理后进行的RNA电泳 这一方法原于McMaster和Carmichael(1977)。含有乙二醛-DMSO的凝胶比含有甲醛的凝胶更难于进行电泳,因为前者泳动速率较慢而且需将电泳液时行循环以避免电泳过程中形成过高的H+梯度。尽管上述两种凝胶具有近乎相
2010-04-16
Northern Blot
Northern Blot Preparation of Formaldehyde Agarose Gel The gel conditions (1% agarose, 1X MOPS, 6.3% formaldehyde) are designed for ~4 hour
2010-04-16
Multiple Tissue Northern (MTN™)Blots
人、小鼠和大鼠的多种组织来源的高质量mRNA,经电泳分离后预转于尼龙膜上预制的即用型Northern杂交膜,免去RNA电泳操作过程 可检测范围:0.5-10kb 可重复使用 提供ExpressHybTM快速杂交液样品 可靠的优良品质 从1991年始,公司就向广大的生命科
2010-04-16
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