• 概述:293细胞的大规模培养

    293细胞是腺病毒载体的包装细胞。腺病毒是继逆转录病毒后用于基因治疗研究的热门载体。直接将腺病毒载体导入人体内表达目的基因,治疗恶性肿瘤、心血管疾病或一些遗传疾病已取得可喜进展;利用腺病毒载体在包装细胞293中表达分泌性蛋白质,如蛋白酪氨酸激酶1C等亦成为生产重组蛋白的一条途径。
    2010-02-07
  • protocol:小鼠胚胎干细胞培养实验方法和操作步骤

    1、一般培养:保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基 细胞复苏 冻存细胞 明胶包被 细胞传代 2 、体外分化 培养基 包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片) 体外分化方法 注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可以参
    2010-02-07
  • ES / MEF cell culture and electroporation of targeting const

    Day 0 One frozen vial of Murine Embryonic Fibroblasts (MEFs) is thawed quickly in a 37oC water bath. When the last bit of ice is melted, sp
    2010-02-07
  • 70种细胞培养常用培养基配方大全

    1、糖发酵管 成分:   牛肉膏 5g   蛋白胨 10g   氯化钠 3g   磷酸氢二钠(Na2HPO4•12H2O) 2g   0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12ml   蒸馏水 1000ml   pH7.4 制法:   1、葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按
    2010-02-07
  • 神经胶质细胞培养方法

    神经细胞(神经元)不易培养,只有在适宜情况下,如接种在胶原底层上,或加入神经生长因子和胶质细胞因子时,可出现一定程度的分化,长出突起等现象,但很难使之增殖。而神经胶质细胞是神经组织中比较容易培养的成分。 人、鼠等脑组织即可用于神经胶质细胞培养,不仅能获得生长的胶质细胞,也可形成
    2010-02-07
  • 原代神经细胞培养操作步骤

    1.取出生后1-3天内的大鼠脑组织后,先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分,置入Hanks液中漂洗1~2次后,置于30~50倍体积的Hank液中,脑组织比较柔软,反复吹打即可制成细胞悬液。 2.为排除脂肪成分和其它碎块,把悬液注入离心管中,在室温直立5~10分钟后,细胞或细胞团块自然
    2010-02-07
  • 巨噬细胞原代培养方法步骤

    1.实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤 1ml(勿注入肠内)。 2.引颈杀死动物,手提鼠尾将全鼠浸入70%酒精中3~5秒。 3.置动物于解剖台上,用针头固定四肢,双手持镊撕开皮肤拉向两侧,暴露出腹膜,但勿伤及腹膜壁。 4.再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸
    2010-02-07
  • RPMI1640培养基的配制及细胞培养的条件

    一、 培养基的特性——细胞生存的环境与条件 1、温度条件(37±0.5℃)   2、pH条件 (7.2~7.4)   3、气体条件   4、水的质量(三蒸)   5、渗透压   6、营养条件   7、无菌条件 二、培养基的分类 1、平衡盐液   2、天然培养基
    2010-02-07
  • 细胞培养(cell culture)的一些常见问题与解答

    1、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗? 不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0, 温度37 ℃其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进
    2010-02-07
  • 细胞培养培养基

    细胞培养培养基(基础培养基、血清、无血清培养基、抗生素与抗有丝分裂剂)基础培养基 绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是 Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生
    2010-02-07