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自上世纪70年代基因工程技术诞生以来，基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行，在技术方法上得到了很大发展，时至今日已取得令人瞩目的成就 。随着人类基因组计划的完成，越来越多的基因被发现，其中多数基因功能不明。利用表达系统在哺乳动物细胞内表达目的

按照宿主细胞的类型，可将基因表达系统大致分为原核、酵母、植物、昆虫和哺乳动物细胞表达系统。与其它系统相比，哺乳动物细胞表达系统的优势在于能够指导蛋白质的正确折叠，提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能，因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天

体外基因表达系统包括原核细胞系统和真核细胞系统。原核细胞系统主要是大肠杆菌细胞，它操作简便、周期短收益大及表达产物稳定，但是表达基因的相对分子质量有限，不宜过大，且不能对表达产物进行一些翻译后加工 、修饰。真核细胞系统包括 CHO等哺乳动物细胞、酵母细胞和昆虫细胞等。昆虫细胞表达

【实验目的】 掌握一种活体染色方法，了解光学显微镜和电子显微镜下液泡系的基本形态结构。 【实验用品】 一、材料和标本蟾蜍一只，软骨细胞电镜照片。 二、器材和仪器光学显微镜一台、手术器材一套、解剖盘一个、载片、盖片、吸水纸。 三、试剂l／3000 中性红染液、Ringer

1、脾细胞和骨髓瘤细胞一般按2：1-5：1的密度混合，有的报道可以到10：1，不过总体来说我们常选3：1-5：1，记住，原则是脾细胞的数量比骨髓瘤的多。 2、融合前，一般用HAT培养基做饲养细胞铺板，这是融合前的准备工作，因为饲养细胞分泌的某些细胞因子有助与融合的杂交瘤细胞生长

报告基因的种类很多，根据对其表达产物的分析检测方法的不同，可将其分为体外报告基因和体内报告基因。前者的分析需要在含有报告分子的细胞裂解液或细胞、组织培养液（分泌型报告基因）中进行报告分子的定量。较典型的有氯霉素乙酰基转移酶基因（CAT）、人生长激素基因（hGH）及分泌型碱性磷酸酶

摘要：细胞内游离钙离子与信号转导以及细胞的各种生理病理现象密切相关，因此检测细胞内游离钙离子具有非常重要的意义。其测定方法随着近年来仪器与技术的进步而有了长足的发展，包括电极法、同位素示踪法、核磁共振法、高流通量测定法、离子指示剂法等，本文主要介绍这些方法的特点和应用情况。 关

金　颖* (中国科学院上海生命科学研究院/ 上海交通大学医学院健康科学研究所, 上海200025) 摘要　　多能性干细胞是具有长期自我更新并产生机体内任何种类细胞潜能的特殊细胞群体。一般来讲, 多能性干细胞包括胚胎干细胞、胚胎生殖干细胞和胚胎肿瘤干细胞。2006 年, 分化的

[实验原理] 　　磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法，磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙 -DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮作用进入靶细胞，被转染的DNA可以整合到靶细胞的染色体中从而产生有不同基因型和表型的稳定

一、实验目的 了解核酸、蛋白质、糖及酶的细胞化学反应原理，掌握Brachet反应及碱性蛋白、酸性蛋白、糖原和过氧化物酶的细胞化学染色方法。 二、实验用品 1.材料和标本蟾蜍、小白鼠各一只、肝脏石腊切片、培养的Hela细胞。 2. 器材和仪器光学显微镜、解剖器材、蜡盘、载玻