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体外培养的细胞源于人或动物或胚胎组织，体内的细胞都是混杂生长，每一种组织都有血管和间叶组织，因此，来源于上述组织的培养材料的原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长，既有上皮样细胞又有纤维样细胞，纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等，混杂的细胞会直接影响实验结果，

常规组织培养法:初代消化培养法.初代组织块培养法与传代培养法1）初代消化培养法： 1、准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。 3、处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks

1、培养用液： HBSS。含有10mmol/L Hepes 的无钙、镁离子的PBS（ph7.4）。 酶消化液。用HBSS配制，含0.025%胰蛋白酶和1mg/ml III型的胶原酶。 细胞分散液。含有1mg/ml BSA、10mmol/L hepes、50U/ml青霉素和5

培养活细胞可用相差显微镜，也可用缩时摄影直接记录活细胞的动态变化，还可将离体活细胞染色。 一、相差显微镜直接观察法： 活细胞对光线是透明的，光线通过活细胞时，波长和振幅几乎没有改变，所以用普通光镜无法看清未经染色的活细胞。为了观察活细胞的结构，则需要通过其他途径提高结构的反差

用实体瘤研究诱导分化比白血病少，实体瘤细胞种类多，其特性不一，诱导分化判定标准各不相同，分化指标一般包括形态和功能的变化，增殖能力下降，致瘤性消失。具体实例有以下几种。 （一）人黏液表皮样癌MEC-1细胞分化诱导实验： MEC-1细胞是一种低分化黏液表皮样癌细胞系，为上皮样细

细胞在体外进行培养，失去了机体的调节和控制，因此，除满足营养的要求外，还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境。外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长。 一、温度： 一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃。温度过高或过低都会影响到细胞的生长。细胞

体外培养的细胞，由于环境因子因素的影响，有时会发生自发转化，由原来的二倍体核型变成多倍体/异倍体核型，细胞的生长特性也随之发生改变而获得永生化，失去接触抑制，可无限繁殖传代。但之二中自发产生的转化不仅时间长，而且转化率极低，介于10-6-10-4之间，需要大量细胞，成功的把握不大

一、[3H]脱氧胸苷摄入法测定细胞数： 1、用RPMI-1640培养液洗涤对数生长期（培养3天）的CTLL-2细胞两次，每次250×g离心10分钟，洗去培养液中残存的IL-2。 2、用台盼蓝（1％ Trypan blue）染色法计数细胞并决定细胞的活力，用10％小牛血清的RP

Protocol for the Primary Culture of Cortical and Hippocampal neurons Set-up for the dissection: Day 1: Add poly D-lysine/laminin solution

1、集落的种类： 不同细胞来源的集落其形态和大小均有所不同. 2、各种集落的培养步骤： 各种造血细胞集落的培养条件有所不同，但其培养过程大致相似，操作步骤大致如下。 分离所要培养的细胞，制成单个核细胞悬液。 配制相应的培养体系。按比例将细胞因子、营养素以及血清等加入到培