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Western-Blot操作流程
试剂配制 (一)母液 1.0mol/L Tris·HCl Tris (MW121.14) 30.29g 蒸馏水 200ml 溶解后,用浓盐酸调pH至所需点(见下所示),最后用蒸馏水定容至250ml,高温灭菌后室温下保存。 PH HCl 7.4 约17ml 7.5 约1
2010-03-25
Western免疫印迹(Western Blot)实验原理和主要试剂
Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。 实验原理 与Southern或 Northern杂交方法类似,但Western Blot
2010-03-25
Western印迹法(试剂配制和操作步骤)
这种技术是把电泳分离的组分从凝胶转移到一种固相支持体,并以针对特定氨基酸序列的特异性试剂作为探针检测之。 Western使用的探针是抗体,它与附着于固相支持体的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性反应。这种技术的作用是对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特异蛋白进行鉴别和鉴定。
2010-03-25
Western Blot Procedure
This is a brief overview of how a western blot (more formally called a protein immunoblot) is performed and what type of data you can obtain
2010-03-25
western blot实验心得与经验总结
前两天做了一个western blot,现在把试验中的一点小小的体会发上来,与大家交流,希望大家多多指点! 1 本实验室采用的脱脂奶粉已经存放了近两年了,虽然是四摄氏度保存,但是其封闭质量还是难以保证的。所以本人的试验结果中出现了小斑点。建议最好使用BSA 或专用的脱脂奶粉进行
2010-03-26
WESTERN BLOT PROTOCOL(美某实验室)
WESTERN BLOT PROTOCOL In a Western blot, proteins that are separated on polyacrylamide gels on the basis of size are transferred to a membr
2010-03-26
Western Blot Protocol ( Western Blot Protocol for Cell Lysat
R&D Systems' QC laboratories use these western blotting and immunostaining protocols to show that our polyclonal and monoclonal antibodies a
2010-03-26
蛋白质印迹免疫分析(Western Blot Anglysis)原理和操作步骤
【基本原理】 蛋白质印迹免疫分析的过程包括蛋白质经凝胶电泳分离后,在电场作用下将凝胶上的蛋白质条带转移到硝酸纤维素膜上,经封闭后再用抗待检蛋白质的抗体作为探针与之结合,经洗涤后,再将滤膜与二级试剂—放射性标记的或辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶偶联抗免疫球蛋白抗体结合,进一步洗涤后,
2010-03-26
CST抗体 Western Blot常见问题与解答
1.Problem:高背景(曝光1-30秒后,背景高或无特异性蛋白带) 2.Problem:信号弱(1-30秒的曝光后检测不到信号) 3.Problem:无着色 4.Problem:着色太浅 5.Problem:着色太深 6.Problem:不正确的染色 Proble
2010-03-26
Western blotting(蛋白质印迹)方法原理和优化
抽滤 抽滤是一种直接将蛋白质转移到膜上的方法。利用真空使溶解的样品滤过膜,蛋白质吸附到膜上,同时样品中其它成分被真空抽走。另外,也可直接将样品点在膜表面使之干燥。随后可对固定在膜上的蛋白质进行分析。 点印记和狭缝印记是抽滤方法的两种变型,用多支管装置将样品加到膜上成点状或狭缝
2010-03-26
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