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流式细胞仪(Flow Cytometry,FCM)技术概述
流式细胞术(FCM)简述 流式细胞术 (Flow Cytometry)是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性(细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等)进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微镜技术与血球计数原理
2010-05-19
流式细胞术发展简史
流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是一种可以对细胞或亚细胞结构进行快速测量的新型分析技术和分选技术。其特点是:①测量速度快,最快可在1秒种内计测数万个细胞;②可进行多参数测量,可以对同一个细胞做有关物理、化学特性的多参数测量,并具有明显的统计学意义;③是一门综合
2010-05-19
流式细胞仪技术概述:样品制备、悬浮细胞的固定和应用
流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号
2010-05-19
流式细胞仪的简要介绍、质量控制和注意事项
一、流式细胞仪的检测范围1.流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、R NA 含量、蛋白质含量。2.流式细胞仪可以检测细胞功能,包括:细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细
2010-05-19
FACSAria流式细胞仪无菌分选的基本流程
一、 环境和液流的消毒 1、 准备足量的无菌1×PBS(3L左右)和去离子水(10L左右)。PBS和去离子水可高压灭菌,sheath桶和装DI水的5L小桶依次用75%医用酒精和无菌去离子水各涮洗三次,然后将无菌PBS和去离子水分别注入相应桶内即可。 2、 房间在分选前紫外灯照
2010-05-19
流式细胞仪与共聚焦显微镜标准微球和定量多色测定法发展
荧光标准微球的使用成为定量流式细胞术的标准品。他能够直观的对比不同实验室数据,同临床流式细胞仪上的质量控制一样的好。在这篇文章中,我们描述的一个简单的方法,为生产基于链霉亲和素功能量子点的多色浓缩标准微球。根据他们广阔的吸收光谱和相对较窄的发射光谱,这可以通过斑点大小调节,量子点
2010-05-19
流式细胞仪检测细胞凋亡:Annexin V/PI双染色法
基本原理 细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面,目前早期识别仍有困难。这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外,使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂,正常主要存在于细胞膜的内面,在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使P
2010-05-19
血小板流式细胞术分析(PLATELET FLOW CYTOMETRY ASSAYS)
流式细胞术是血小板分析研究最好的方法,该法可提高检测灵敏度、并减少人为因素的干扰,该法可以精确地检测病人血小板生成方面的情况,即使血小板计数很低时也可检测表面标记。 血小板RNA 含量 (网织血小板) 血小板RNA 含量与血小板生成状态相关,他可以区分是因为骨髓抑制或外周破坏
2010-05-19
PNH的流式细胞术检测步骤介绍
常要先做20-30份正常人血样划定阳性区I区范围,同型阴性对照界定 III 区范围,中间的区域即为 II区。 1. 取抗凝全血 100ul(检测淋巴细胞、粒细胞或单核细胞)或5ul(检测红细胞), 检相应荧光标记抗体 CD55,CD59,CD48等。 2. 室温避光温育
2010-05-19
流式细胞术抗体标记常见问题分析
问题 解决方法 无法标记 确保所有的抗体都按照厂商的说明书正确存储。 确保商品化抗体没有超过有效期。 确保已正确加入足量的抗体。 确保抗体已连接荧光素。如果未连接荧光素,需加入连接有荧光素的二抗。 Ensure that secondary antibody is
2010-05-19
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