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原代细胞分离和培养基本步骤 1、器官和组织的选择 尽可能的去除不必要的组织和血迹。 2、原代细胞的分离 （1）应用PriCells原代细胞分离试剂盒I、II、III。 （2）根据组织来源不同，可选用不同的PriCells原代细胞分离试剂盒。 3、原代细胞的培养： （

原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化 PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化 原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长，既有上皮样细胞又有纤维样细胞，纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。 在体外培养

原代细胞冻存技术 1、选用生长情况好，数量较多的原代细胞，冻存前一天换液一次。 2、贴壁细胞需用0.25％胰酶常规消化将细胞消化下来，将细胞悬液收集至离心管中。 3、1000rpm离心5分钟，弃上清液。 4、沉淀加含DMSO的培养液，计数，调整至（1-10）×106/ml

移液器在使用过程中，如果怀疑其精确度，可根据以下提示自行检测： ● 移液器是否有漏气的问题？ 1. 自行检测： 目视法检测：将吸取液体后的移液器垂直静置 15 秒，观察是否有液滴缓慢 的流出。若有流出，说明有漏气现象。 压力泵检测：使用专用的压力泵，检测压力情况，判断是

PriCells-原代细胞鉴定技术 一、形态学鉴定 1. 在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征 2. 细胞染色检查 ： a) 将无菌玻片置于细胞培养皿中，加细胞悬液后培养； b) 待细胞长满玻片后取出，用PBS清洗，之后放于载玻片上，待其自然干燥； c) 用PBS

PriCells-无血清培养基一些基本配方 1、基本适应于神经细胞，干细胞，PC12细胞 葡萄糖 0.6% 谷氨酰胺 2mM NaHCO3 3mM Hepes 5mM 胰岛素 2.5

PriCells-细胞培养 + ELISA的结合产物：ELISPOT技术 ELISPOT（Enzyme-Linked Immunosorbent SPOT, 酶联免疫斑点法）：是一种体外检测特异性抗体分泌细胞和细胞因子分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术，是ELISA技术和细胞培养技

免疫荧光技术简介 PriCells-免疫荧光技术（Immunofluorescence technique） 1941年，Coons等于首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescent antibody te

PriCells: 磁珠法分离小鼠T细胞和B细胞 基本方案 用AUTOMACS系统进行总T细胞、CD4+细胞或CD8+T细胞的自动分离 实验材料 1、小鼠 2、HBSS洗涤缓冲液 3、MACS缓冲液 4、磁珠 5、RPMI-10完全培养基 6、AUTOMACS系

PriCells-小鼠单个核细胞分离一步梯度法去除死细胞 基本原理 活细胞（密度较小）和死细胞（密度较大）密度不同，从而有助于将活的淋巴细胞和红细胞分离。 附加材料 高密度溶液：Ficoll-Paque（Ficoll和泛影酸钠；Pharmacia LKB）或Lymphol