动物细胞蛋白质的提取方法

2010-02-20 11:53 · Tina

1、将高压的 PBS洗涤细胞瓶两次,弃PBS,倒置纸巾上吸干。 2、加入2 ml裂解液10×permeabilization buffer 2 ml。 3、放入冰箱里裂解,平放,拧紧盖子,置摇床半小时,200 转/min。 4、收集裂解液至 1.5 ml EP管,分两管,1

1、将高压的 PBS洗涤细胞瓶两次,弃PBS,倒置纸巾上吸干。

2、加入2 ml裂解液10×permeabilization buffer 2 ml。

3、放入冰箱里裂解,平放,拧紧盖子,置摇床半小时,200 转/min。

4、收集裂解液至 1.5 ml EP管,分两管,12000 rpm,4 ℃离心,5 min使之沉淀。

5、取上清液,把两管合为一管,超滤,5000 g,4 ℃离心到100-120微升后,倒置300-500 rpm。

6、取上清液分装至-20/-80度保存。

关键词: