细胞毒试验实在组织培养中研究淋巴细胞、抗体或抗体依赖性淋巴细胞杀伤靶细胞的一种技术，也是在体外研究特异性细胞免疫比较可靠和灵敏的方法，目前微量细胞毒试验是应用最广的一种方法。
（一）淋巴细胞对肿瘤细胞的细胞毒试验方法：
1)肿瘤细胞培养物制成悬液，并稀释至需要的细胞浓度。
2)于微量试验班的小孔内分别接种0.2ml肿瘤细胞（内含5×102）个细胞，37℃培育24h。
3)细胞贴壁后，轻轻轻去培养基，加1mlPBS洗涤，轻去洗涤液及未贴壁细胞。
4)向小孔分别加入0.2ml不同浓度的淋巴细胞（分别含有5×105个细胞，5×104个细胞，5×103个细胞），使淋巴细胞与癌细胞之比依次为1000：1、100：1、10：1.
5)45min后加0.1ml5%胎牛血清，37℃继续培养2-3天。
6)2%台盼蓝染色，翻转微量试验班，计数活存的肿瘤细胞，并设正常人淋巴细胞代替肿瘤患者淋巴细胞作对照，每份需同时做3个复孔，分别检查各孔中存活活细胞数，按下列公式计算细胞毒率，并做t检验。
（二）抗体加补体的细胞毒试验方法：
此法是组织相容性抗原（HLA）检查技术中最常用的一种方法。也称微量淋巴细胞毒试验。人体的组织相容性抗原存在于淋巴细胞膜的表面，从供者与受者的血液分离淋巴细胞作为靶细胞，以各种定型单价抗血清与家兔血清补体作为效应系统。如果淋巴细胞表面具有与抗血清相对应的抗原，则淋巴细胞就会受损伤或致死而被台盼蓝染色。
1、 材料：
淋巴细胞
血清。小牛血清（56℃灭活30min）
待测血清。收集多产妇分娩时的胎盘剥离后的血，分出血清，叠氮纳防腐，4℃保存。
已知阳性对照血清。用上海市中心血站制备的马抗人淋巴细胞血清（ALS），同时做1：3稀释。
补体。新鲜家兔混合血清，分装小试管，保存于-20℃。
2、 操作步骤：
在塑料试验盒内加入医用液体石蜡油20ml，放进一块52孔微量玻璃试验班，使板沉至盒底。
用0.25ml的微量定量加液器分别加入待测血清和阳性对照血清2-2ul/孔，阴性对照用Hanks液代之。加样针尖应磨平。
用同法每孔内加入待测的淋巴细胞2-3ul，应先加阴性对照和补体对照孔，然后加待测孔，最后加阳性血清对照孔，加后轻摇使其混匀，置室温作用1h。
每孔加入兔补体5-7ul（按加淋巴细胞顺序加入），置37℃培育45min（或室温作用1h）。
每孔加入2%台盼蓝等渗液3-5ul室温中静置20min，吸去蓝色上清。
普通显微镜检查，记录每孔中死细胞（着色细胞）数。
a、死细胞。体积稍大，着蓝色，无折光性。
b、活细胞。大小正常，未着色，较透亮。
c、判断标准（每次实验，需做3-6个复本）。
其中着色细胞：《=20%为阴性
20%--50%为弱阳性
50%--70%为阳性
》=70%为强阳性
